4.β-半乳糖苷酶試驗(ONPG試驗)(1)原理:乳糖發酵過程中需要乳糖通透酶和β-半乳糖苷酶才能快速分解。有些細菌只有半乳糖苷酶,因而只能遲緩發酵乳糖,所有乳糖快速發酵和遲緩發酵的細菌均可快速水解鄰硝基酚-β-D-半乳糖苷(O-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside,ONPG)而生成黃色的鄰硝基酚。用于枸櫞酸菌屬、亞利桑那菌屬與沙門菌屬的鑒別。...
但需及時挑取白色菌落,當培養時間延長,白色菌落會逐漸變成微紅色,影響挑選。 7、X-gal 是5-溴-4-氯-3-吲哚-b-D-半乳糖(5-bromo-4-chloro-3-indolyl-b-D-galactoside)以半乳糖苷酶( b-galactosidase) 水解后生成的吲哚衍生物顯藍色。...
當外源基因插入時,二者溶為一體后,有β-半乳糖苷酶表達,在生色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(x-gal)培養基中形成蘭色菌落。而當有外源基因插入到多克隆原點,從而造成插入失活,而使 lacZ基因不表達而形成白色菌斑。 通過顏色不同而區分重組子和非重組子。位于不同載體或染色體上的...
受體菌則含編碼β-半乳糖苷酶C端aa的序列。 當外源基因插入時,=者溶為一體后,郁_半乳糖苷酶表達,在生色底物5 -溴4氯3-~吲哚β-D_半乳糖苷(x-al)培養基中形成蘭色菌落。而當有外源基因插入到多克隆原點,從而造成插入失活,而使lacZ基因不表達而形成白色菌斑。通過顏色不同而區分重組子和非重組子。...
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