常見問題解決方案

1 調整流動相比例，加大緩沖液的比例。C18柱調整流動相至離子對試劑：乙腈=92：8，C8柱調整流動相至離子對試劑：乙腈=90：10（液相方法）。

2 將柱溫設置于40℃以上。

1 平衡時間過短：延長平衡時間。

2 色譜柱污染：沖洗色譜柱。

3 色譜柱沒有連接好，有漏液現象：檢查連接情況。

4 液相儀器檢測器污染：進行儀器維護。

5 液相儀器檢測器氘燈能量過低：更換檢測器氘燈。

1 溶劑效應：用國標方法溶解，降低溶解溶劑強度。

2 色譜柱污染：沖洗色譜柱，若嚴重污染，更換色譜柱。

3 色譜柱填料塌陷：維修或更換色譜柱。

4 液相儀器柱外效應過大：更換管路，減小柱外效應。

5 樣品體積過大：用流動相配樣，總的樣品體積小于第一峰的15%。

6 將色譜柱柱溫過低：提高柱溫。

1 泵內有空氣：清除泵內空氣，對溶劑進行脫氣處理。

2 比例閥失效：更換比例閥。

3 泵密封墊損壞：更換密封墊。

4 溶劑中有氣泡：對溶劑脫氣，必要時改變脫氣方法。

5 系統漏液：找出漏點，密封。

6 梯度洗脫：壓力波動是正常的。

7 單向閥堵塞：超聲波清洗單向組件。 8 單向閥泄露：更換密封裝置。

1 柱溫變化：保持恒定柱溫。

2 等度與梯度間未能充分平衡：至少用10倍柱體積的流動相平衡柱。

3 緩沖液容量不夠：用>25mmol/L的緩沖液。

4 柱污染：每天沖洗柱。

5 柱內條件變化：穩定進樣條件，調節流動相。

6 柱快達到壽命：采用保護柱。

1 流速增加：檢查泵，重新設定流速。

2 樣品超載：降低樣品進樣量。

3 鍵合相流失，流動相pH值超出適用范圍，色譜柱連接方向錯誤。

4 流動相組成變化：防止流動相蒸發或沉淀。

5 溫度增加。

1 流速下降：管路泄漏，更換泵密封圈，排除泵內氣泡。

2 硅膠柱活性變化：可以用流動相改性劑，如加三乙胺，或采用其它堿鈍化色譜柱柱。

3 鍵合相流失：流動相pH值超出適用范圍，色譜柱連接方向錯誤。

4 流動相組成變化：防止流動相蒸發或沉淀。

5 溫度降低。

1 進樣閥殘余峰：用強溶劑清洗閥，改進閥和樣品的清洗。

2 樣品中未知物：處理樣品。

3 柱未平衡：重新平衡柱，用流動相作樣品溶劑（尤其是離子對色譜）。

4 三氟乙酸（TFA）氧化（肽譜）：每天新配，用抗氧化劑。

5 水污染（反相）：通過變化平衡時間檢查水質量，用HPLC級的水。

1 氣泡（尖銳峰）：流動相脫氣，加柱后背壓。

2 污染（隨即噪聲）：清洗柱，凈化樣品，用HPLC級試劑。

3 檢測器燈連續噪聲：更換氘燈。

4 電干擾（偶然噪聲）：采用穩定電源，檢查干擾的來源（如水浴等）。

5 檢測器中有氣泡：流動相脫氣，加柱后背壓。

1 柱超載：降低樣品量，增加柱直徑或采用較高容量的固定相。

2 峰干擾：清潔樣品，調整流動相。

3 硅羥基作用：加三乙胺，用堿屏蔽硅羥基活性，增加緩沖液或鹽的濃度降低流動相pH值，鈍化樣品。

4 篩板堵塞：超聲清洗或更換篩板，加在線過濾器過濾樣品。

5 柱塌陷或形成短路通道：更換色譜柱，采用較弱腐蝕性條件。

6 死體積或柱外體積過大：盡可能采用細內徑的連接管。

7 柱效下降：用較低腐蝕條件，更換柱或采用保護柱。

1 進樣體積過大：用流動相配樣，總的樣品體積小于第一峰的15%。

2 在進樣閥中造成峰擴展：進樣前后排除氣泡以降低擴散。

3 數據系統采樣速率太慢：設定速率應是每峰大于10點。

4 檢測器時間常數過大：設定時間常數為第一峰半寬的10%。

5 流動相粘度過高：增加柱溫，采用低粘度流動相。

6 檢測池體積過大：用小體積池，卸下熱交換器。

7 保留時間過長：將連接管徑和連接管長度降至最小，采用細內徑管路。

8 柱外體積過大：將連接管徑和連接管長度降至最小，采用細內徑管路。

9 樣品過載：降低進樣濃度，或減少進樣體積。