高效液相色譜法測定胍西替柳片的含量

1 儀器與試藥 
     儀器：依利特P230系列HPLC儀；UV230檢測器。EC2000工作站。試藥：胍西替柳片(大連弘豐制藥廠)，胍西替柳對照品(大連弘豐制藥廠)。甲醇為色譜純。

2 實驗方法與結果 
2．1 系統條件與系統適用性色譜柱：迪馬公司Cl8(150mmx4.6mm，5μm)，流動相：甲醇-水(70：30)，流速為1.0ml／min，檢測波長為276nm，柱溫：室溫，進樣量：10μl。理論板數按胍西替柳應不低于2800[n=5.54(tR／Wh／2)的平方]。 
2．2 標準曲線的制備 
     精密稱取胍西替柳對照品22.04mg，置25ml量瓶中，加甲醇10ml溶解，加流動相稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取0.2，0.6，1.0，1.4，1.8ml，用流動相稀釋至10ml，搖勻，照上述色譜條件測定。以進樣量(ug)為橫坐標， 峰面積 為縱坐標，進行線性回歸，回歸方程為Y=922382X一424.9，r=0.99996，結果表明，在進樣濃度依次為0.18～1.59ug范圍內線性關系良好。
2．3 回收率試驗取相當于胍西替柳20mg處方量的80％，100％，120％，精密稱定，分別加入相應量的混合輔料，置9個25ml量瓶，加甲醇溶解并稀釋至刻度。搖勻，濾過，精密量取續濾液1ml，加流動相稀釋至10ml，搖勻，照上述色譜條件測定，計算胍西替柳的回收率。 
2．4 精密度試驗
    精密稱取同一批號的供試液，按“2．7&”項下方法制備后，連續進樣5次，測定峰面積 ，計算胍西替柳的含量，考察儀器精密度，結果表明，儀器精密度良好，其RSD為0.88％。
2．5 重復性試驗精密稱取同一批號5份樣品，
    按“2．7”項下方法制備后，在上述色譜條件下進行分析，計算胍西替柳的含量，考察方法重復性，結果表明，方法重復性良好，其RSD為0.9％。
2．6 溶液穩定性試驗
    取胍西替柳樣品溶液，室溫下放置，按上述色譜條件，分別于0，2，4，6，8h進樣分析，記錄色譜峰面積，胍西替柳峰面積的RSD為0.81％。結果表明，室溫下供試品溶液在8h內是穩定的。
2．7 樣品測定取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當于胍西替柳20mg)，置25ml量瓶中，加甲醇適量，使胍西替柳溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液1ml，置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，精密計算含量。

3.討論
3．1溶劑的選擇經試驗，胍西替柳在酸、堿中均不穩定，在水中不溶，在甲醇中溶解。所以樣品先用甲醇溶解，再用流動相稀釋成測定濃度。
3．2 檢測波長的選擇取
    胍西替柳對照品適量，加甲醇制成每1ml中含80μg的溶液，在400～200nm范圍掃描，在276nm波長處有最大吸收且輔料無干擾，故檢測波長定為276nm。
3．3 流動相的選擇 我們曾先后選擇了甲醇-水(30：70)，甲醇-水-(55：45)，甲醇-水(70：30)作為流動相的樣品進行分析，結果最佳的流動相為甲醇-水(70：30）