知識堂：液相色譜（五）

5、檢測器

檢測器是液相色譜的三大關鍵部件之一。理想的檢測器應具有以下特點：

• 靈敏度高;
• 對溫度變化和流量波動不敏感;
• 死體積小，不使峰額外地擴展;
• 對溶劑無響應，能用于梯度洗脫操作;
• 線性范圍寬;
• 對所有樣品都有響應;
• 對樣品無破壞性。

在高效液相色譜技術發展中，至今還沒有一種檢測器可以同時滿足以上幾點要求。

檢測器的主要性能指標：

• 噪聲(Noise)和漂移(Drift);
• 靈敏度(Sensitivity);
• 檢測限(Detectability);
• 線性范圍(Linear range);
• 波長的精度和準確度。

檢測器的種類繁多，常用的有紫外一可見分光檢測器、熒光檢測器、示差折光檢測器、電化學檢測器、二極管陣列檢測器、測定大分子絕對分子量的多角度激光光散射儀。另外還有蒸發光檢測器、化學發光檢測器、手性檢測器(旋光檢測器、圓二色檢測器)、分子量檢測器、放射性檢測器、熱學性質檢測器、光電導檢測器、磁旋光檢測器等。

5.1 紫外檢測器

紫外檢測器應用最廣，對大部分有機化合物有響應。特點是靈敏度高；線形范圍高；流通池可做的很小（1mm×10mm ，容積 8μL）；對流動相的流速和溫度變化不敏感；波長可選，易于操作；可用于梯度洗脫。

它與固定波長紫外檢測器的主要差別在于使用一個連續光源（如氘燈），以光柵（或棱鏡）分光。光源發出的復合光（從190nm至600nm附近），光柵分光能夠隨意選擇定的檢測波長以匹配被測物質的最大吸收波長。

5.2 光電二極管陣列檢測器

光電二極管陣列檢測器由1024個二極管陣列，各檢測特定波長，計算機快速處理，三維立體譜圖，如圖所示。

二極管陣列檢測器可以記錄190nm-900nm波長吸收光譜數據，可直接貯存色譜圖中每一個點的吸收光譜。光源發出的光，通過透鏡把光聚焦在檢測池上。從檢測池出來的光，通過透鏡、狹縫到全息光柵上，經光柵分光后由一排光電二極管接收并轉換為電信號，貯存于計算機中。DAD的最大優點在于利用ＵＶ光譜識別并進行純度分析，還可以畫出保留時間、波長和吸光度的三維立體空間譜圖等，這是目前較先進的紫外檢測器。下圖是DAD檢測器工作原理示意圖。

5.3示差折光檢測器

示差折光檢測器是除紫外檢測器之外應用最多的檢測器，可連續檢測參比池和樣品池中流動相之間的折光指數差值。差值與濃度呈正比，也是一種通用型檢測器（每種物質具有不同的折光指數），缺點是靈敏度低、對溫度敏感、不能用于梯度洗脫；有偏轉式、反射式和干涉型三種；

5.4熒光檢測器

現代的熒光檢測器具有高的靈敏度和可靠性，可用波長時間程序自動切換激發、發射波長在多組分分析時可切換到各組分的最佳分析波長，實現高靈敏度和高效率。利用波長掃描功能，可在工作站系統控制器的畫面上顯示目的成分的激發、發射光譜，很容易進行最佳波長的選定。

熒光檢測器具有高靈敏度、高選擇性，對多環芳烴，維生素B、黃曲霉素、卟啉類化合物、農藥、藥物、氨基酸、甾類化合物等有響應。其示意圖為

5.5蒸發光檢測器

蒸發光檢測器(evaporationla sersp urtd etector,ELSD)是質量型、高靈敏度的通用液相色譜檢測器。它檢測的三個主要過程為

• (1)霧化：色譜柱流出物經過針頭式的細導管進人霧化器，與氣體混合噴成均勻一致的霧滴；
• (2)蒸發：霧滴經過加熱的漂移管，流動相被蒸發，溶質形成極細的顆粒；
• (3)檢測：溶質顆粒氣體在檢測池發生散射作用，經光電倍增管成電信號輸出。

基于它的工作原理，原則上對所有的化合物都能測定，不論化合物是否存在生色團或電活性基團；檢測器的響應直接與被洗脫化合物的質量有關，對未知物可以得到準確的定量；因在檢測前被洗脫的化合物已除去流動相，適用于梯度洗脫。由于它的這些優點，它有可能像氣相色譜中的氫火焰檢測器(FID)那樣成為液相色譜的高靈敏度通用檢測器。

還有一些其它檢測器（略）。