DNPH比色法:一種簡單的蛋白質羰基含量測定方法

自由基對機體的氧化損傷大致分為5 個方面: (1)對抗氧化系統的損傷; (2) 對DNA 的氧化損傷。(3) 對脂質的氧化損傷,近幾年發現的82異前列腺素F2α(8-iso2PGF2α) 是自由基損傷細胞膜脂質更好的指標; (4)對蛋白質的氧化損傷; (5) 對糖類的氧化損傷,反映自由基對糖影響的標志物目前還不多,常用的指標有透明質酸[1 ] 。蛋白質不僅是生物體的重要組成成分,而且在生命活動中擔負重要的功能,在生物體中有催化、調節、轉運、貯存、運動和支架作用等功能。對蛋白質氨基酸側鏈的氧化可導致羰基產物的積累。蛋白質的羰基化被廣泛地用于評價各種生物有機體的氧化程度[2 ] ,蛋白質羰基含量是蛋白質氧化損傷的敏感指標[3 ] 。2 ,42二硝基苯肼(DNPH) 比色法是測定蛋白質羰基含量的經典方法。目前這種方法在國內罕有報道和介紹,現就DNPH 比色法的原理、具體實現方法、應用、特點以及本實驗室在從事相關實驗研究中獲得的經驗和一些值得注意的問題予以介紹。