小鼠神經細胞蛋白質的SDS2PAGE 聚丙烯酰胺電泳及免疫印記鑒定方法的建立

摘　要:目的　建立一套組合的磷蛋白分析法檢測小鼠神經細胞中參與信號轉導的蛋白激酶和信號分子。方法　培養新生乳小鼠神經細胞,提取蛋白質,并進行SDS2PAGE 凝膠電泳,當電泳結束后利用半干式不連續轉移緩沖系統將凝膠上的蛋白質轉移到PVDF 支持膜上,結合免疫印跡和曝光自顯影,即得到了小鼠神經細胞中磷蛋白分子(MEK2) 的免疫印跡圖譜。結果　通過上述方法成功地獲得了小鼠神經細胞磷蛋白組中磷蛋白分子(MEK2) 的免疫印跡圖譜。結論　利用此組合方法可以檢測小鼠神經細胞中參與信號轉導的蛋白激酶或信號分子[1 ] 。實驗證明本法操作簡單,無放射性污染,靈敏度高、特異性強,經濟適用,行之有效。