水稻花粉總蛋白質雙向凝膠電泳方法建立及應用

摘　要: 采用石英砂加液氮研磨方法破碎花粉,然后用兩種不同的方法提取水稻花粉總蛋白質,之后采用固相p H 梯度等電聚焦/ SDS2PAGE 雙向凝膠電泳對紅蓮型細胞質雄性不育水稻單核期花粉總蛋白質進行了分離。通過銀染顯色,PDQuest 2DE 軟件可識別約1 000～1 500 個蛋白質點。其中TCA2丙酮提取法更適合提取花粉總蛋白質進行雙向凝膠電泳分離,并可獲得分辨率和重復性較好的雙向電泳圖譜。對紅蓮型細胞質雄性不育水稻的不育系單核期和二核期花粉總蛋白進行了雙向電泳分離,通過比較兩個時期花粉蛋白質電泳圖譜后發現,二核期的花粉蛋白質較單核期花粉蛋白質數目減少,并且部分蛋白質表達量下降。