水稻根質膜蛋白質組雙向電泳水化液的優化

摘　要:以水稻(Ory z a sati va L. ) 苗期幼嫩根尖作為材料,利用葡聚糖2聚乙二醇兩相分配法純化得到純度達90 %的質膜組分,使用4 種不同的水化液溶解質膜蛋白, 進行IEF/ SDS2PA GE 雙向電泳和MALDI2TOF/ TOF 質譜分析. 結果顯示,4 種水化液中,以7 mol/ L Urea 、2 mol/ L Thiourea 、4 % CHAPS、20 mmol/ L DTE、1 % ASB14 的條件
對膜蛋白的溶解效果和雙向電泳分離效果最好;16 個被鑒定蛋白中有9 個為質膜相關蛋白,5 個為未知蛋白,來自其它細胞器的蛋白僅有2 個. 研究表明,在常用水化液中添加磺基甘氨酸三甲內鹽ASB14 有利于植物細胞質膜蛋白質組的分析,并且該優化條件下的雙向電泳適合分離水稻質膜中親水性相對較高的膜附著蛋白.