桃果實蛋白質雙向電泳影響因素的研究

摘　要: 以‘大久保’桃( Prunus persica L. ‘Okubao’) 果實為試材, 通過比較不同上樣量、不同上樣緩沖液、不同平衡緩沖液、不同染色方式等條件下的雙向電泳圖譜, 探討以上各因素對桃果實雙向電泳圖譜效果的影響。結果表明考馬斯亮藍染色后的電泳圖譜雖然蛋白質點的數量少于銀染色后的圖譜, 但背景較為清晰, 適用于蛋白質組分析。采用固相pH梯度17 cm膠條, 100μg蛋白質上樣量, 樣品干粉溶于375μL含有硫脲、磺基三甲基胺乙內脂3210的上樣緩沖液中, 等電聚焦后用含有磷酸三丁酯的平衡緩沖液還原, 進行SDS2PAGE, 銀染色得出的雙向電泳圖有蛋白點1 209個, 紋理較少, 適用于桃果實蛋白質組學分析且兼容于下游技術的蛋白質質譜鑒定。