人源抗HBs 基因工程抗體在E. coli 中的高效表達與折疊研究

[摘　要] 　目的　高效表達是基因工程抗體走向臨床的關鍵問題之一。本試驗旨在研究人源抗HBs 基因工程抗體在E.coli 中的高效表達與折疊。方法　本實驗將抗HBsAg 抗體的輕鏈(L) 和重鏈Fd 段基因,分別克隆于pET20b 質粒中并分別轉化到大腸肝菌BL21(DE3) ,IPTG誘導后,SDS2PAGE 分析發現在Mr27 000(L) 和Mr25 000(Fd) 處有外源蛋白表達,表達蛋白含量分別為53 %和48 %。L 鏈和Fd 包涵體蛋白經鹽酸胍變性后,等量混合于折疊液中。結果　L 和Fd 可復性形成了Mr 約50 000 的蛋白,ELISA 結果表明,復性蛋白具有與HBsAg 結合的能力。結論　抗HBsAg 抗體Fab 段在大腸桿菌中的表達與復性的成功,表明包涵體表達基因工程抗體在技術是可行的。