一、實驗目的與任務
了解XF—1B型(或Hb—2000型)血紅蛋白儀的使用方法,掌握血紅蛋白的測定技術。有訓練運動員在較好訓練效果的影響下血紅蛋白正常值高于正常成年人,因此,血紅蛋白的測定是評定訓練效果的重要指標。
二、原理
測定血紅蛋白的方法很多,常見的有直接比色,光電比色法,沙利氏比色法(間接比色法)。
我們現在實驗室用的是XF—1B型和Hb—2000型血紅蛋白儀。此儀器是采用氰化高鐵法,應用光電比色的原理測定血紅蛋白值的,其原理是:將全血樣品20ul注入5ml氰化高鐵血紅蛋白稀釋液內(亦稱文—齊氏液),作251倍稀釋,溶化紅細胞釋出血紅蛋白。稀釋劑將血紅蛋白先轉變成高鐵血紅蛋白,再轉化為氰化高鐵血紅蛋白。然后,再用XF—1B型(或Hb—2000型)Hb儀比色法直接測定顯示濃度數,不需任何換算(每次測定只需5秒鐘)。
三、實驗器材
XF—1B型和Hb—2000型血紅蛋白儀、一次性血細胞吸管(刻度10~20ul)、采血針、75%酒精、消毒棉球、培養皿、燒杯、可調加液器、試管架、血紅蛋白測定試劑(文—齊氏液)、氰化高鐵血紅蛋白標準液。
四、實驗步驟
1、插上電源,打開血紅蛋白儀電源開關,按動進樣開關,重復三次吸入蒸餾水,并通電預熱20~30分鐘。觀察顯示是否為“零”。(按出Hb儀器左下角“測試—定標”按鍵,使之處于“測試”狀態。)
2、取試管一支,加入Hb測定試劑(文—齊氏液)5ml,放在試管架上備用。
3、采血、比色:先消毒,再用采血針在耳垂或無名指尖處采血,用干棉球擦去第一滴血,待第二滴血自然流出一大滴時,用血細胞吸管取血液20ul(注意:吸管內不可有氣泡,否則需重新采血)。擦去吸管外血液后,輕輕吹入測定管底部,并回吸數次洗凈吸管,然后充分混合均勻。待5分鐘后,置Hb儀上比色。
4、記錄:直接讀數,記錄下來。
Hb值通常以每100 ml血液中含Hb若干克來表示。(g/ml)。
本儀器采用國際單位制(g/L),可直接顯示Hb值(g/L)。
我國正常成人,男子約:120~150 g/L
女子約:110~140 g/L
男運動員不超過:170 g/L,
女運動員不超過:160 g/L。
五、注意事項
1、每人每次測試前應先將Hb儀進樣處吸入蒸餾水,沖洗流通池。使顯示數值為“000”。
2、比色前將儀器前部左下角“測試—定標”鍵置于測試狀態。
3、Hb儀采樣吸管一定要全部侵入液體中,避免氣泡吸入,否則影響測定結果,若有氣泡請重新操作測試一次。
4、若“零點”漂移絕對值>2g/L,需調整“調零”旋鈕,使儀器顯示回到“000”。