應用激光捕獲顯微切割技術制備肺癌蛋白質組學研究樣品

摘要:目的　探討應用激光捕獲顯微切割(laser capture microdissection , LCM) 技術獲取高同質性肺癌組織細胞及正常對照肺泡上皮細胞的方法及可行性。方法　將新鮮肺癌組織標本及其配對正常組織常規制備8μm 冰凍切片,采用改良的HE 方法染色;應用LCM 技術大宗切割肺鱗癌、腺癌及正常對照肺泡上皮細胞;選擇性獲取同質肺癌細胞和配對正常細胞。結果　通過LCM 技術可以準確、快速地分離癌細胞、間質及其他壞死組織,得到同質性不低于95 %的腫瘤細胞和正常細胞。按照Duration 15. 5 s 的激光脈沖頻率和平均8 000 shot s 條件,既可保證每個帽子的細胞收集數量,也能夠有效地縮短實驗時間,提高實驗可控性,從而使操作過程標準化。結論　應用LCM 技術可以成功獲取同質肺癌細胞和正常細胞。其所需標本量少、組織同質性高、操作過程穩定、可控性好,是肺癌分子生物學及蛋白質組學研究有價值的樣品制備方法。