應用激光捕獲顯微切割和蛋白質組學技術篩選鼻咽癌的差異表達蛋白質

[摘要] 　目的: 篩選鼻咽癌( nasopharyngeal carcinoma , NPC ) 的差異表達蛋白質, 為尋找NPC 的分子標志物提供科學依據。方法: 采用激光捕獲顯微切割技術( laser cap ture microdissection , LCM ) 分別從NPC組織和正常鼻咽上皮組織( normal nasopharyngeal ep ithelial tissue , NNET) 中純化NPC 細胞和正常鼻咽上皮細胞( normal nasopharyngeal ep ithelial cells, NNEC) ,應用二維凝膠電泳( 2 2DE ) 分離LCM 純化細胞的蛋白質,圖像分析識別差異表達的蛋白質點,基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(MALD I2TOF 2MS) 和電噴霧電離串聯質譜( ESI2Q 2TOF 2MS)鑒定差異蛋白質點,Western 印跡和組織芯片( tissue microarray, TMA ) 免疫組織化學驗證差異蛋白鱗狀細胞癌抗原1 ( SCCA1 ) 在兩種組織中的表達水平。結果: 建立了LCM 純化的NPC細胞和NNEC的2 2DE圖譜,質譜鑒定了36 個差異蛋白質, 其中20 個蛋白只在NPC 表達或表達上調, 1 6 個蛋白在NPC中表達下調或缺失。Western 印跡和組織芯片免疫組織化學結果顯示: SCCA1在NPC中的表達水平較NNET明顯下調,與比較蛋白質組學結果一致。結論: 3 6 個差異蛋白可能與NPC的發病有關,為篩選NPC分子標志物奠定了基礎。