順鉑作用HeLa 細胞的蛋白質組學研究

【摘要】　目的:用雙向電泳———質譜法分析順鉑作用于人宮頸癌HeLa 細胞后蛋白質組的變化。方法:體外培養HeLa 細胞,用MTT 法觀察不同時間、不同濃度順鉑對細胞的增殖抑制作用。加入10μg/ mL順鉑作用于細胞24 h ,提取總蛋白,進行雙向電泳測定,凝膠考染顯色,用ImageMaster 2D Platium 510軟件對獲得的蛋白圖譜加以分析,尋找差異表達的蛋白質。切取差異點,膠內酶切后進行MALDI2TO2F2MS 分析和數據庫搜索,實現對蛋白點的定性鑒定。結果:順鉑可顯著抑制HeLa 細胞的生長,且具有一定的時效和量效關系。經雙向電泳和質譜后,成功鑒定了7 個蛋白質,包括原肌球蛋白、肌動蛋白、磷酸丙糖異構酶,磷酸甘油酸激酶和親環蛋白A 等。結論:順鉑可顯著抑制HeLa 細胞的生長, 并引起HeLa 細胞蛋白質組的改變,可能與順鉑的抗腫瘤作用有關。