高效親和色譜法檢測細胞培養上清中的抗體融合蛋白質

摘　要:目的建立高效親和色譜檢測抗體融合蛋白質的方法,用于抗體及抗體融合蛋白質生產的過程控制。方法正壓勻漿法裝填rProtein A Sepharose ,用不同pH值緩沖液分步洗脫。結果在25～1 000μg/ mL 濃度范圍內,重組人腫瘤壞死因子受體2抗體融合蛋白(TNFR2Fc) 濃度和峰面積顯著相關, r = 0. 999 6 ; 回收率范圍為91 %～99 % ,對表達TNFR2Fc 的CHO 工程細胞的不同培養階段的3 份上清分別進行3 次重復測定, RSD 在2 %以內。結論該方法適用于抗體及抗體融合蛋白質生產的過程控制。