環境樣品中DNA 的分離純化和文庫構建

摘　要:采用研磨/ 凍融和SDS/ 蛋白酶K熱處理等理化方法,直接從性質不同的環境樣品中提取和純化混合基因組DNA。所獲得純品DNA 的產量為每克樣品2～16μg。對純品DNA進行限制性內切酶處理后,構建了以pUC18 為載體的DNA 文庫。建庫效率為從每克環境樣品獲得約103～104 個含3～8kb 外源隨機插入片段的克隆。通過DNA 序列測定和基因注釋,對從文庫中隨機選取的克隆進行了分析,發現外源插入片段均含序列未見報道的新基因。本文所做的嘗試對于保存、研究和開發未培養微生物基因資源具有意義。