谷氨酰胺轉胺酶的分離純化及酶學性質

摘　要: 茂原鏈輪絲菌S t reptoverticillium mobaraense 所產生的谷氨酰胺轉胺酶發酵液通過抽濾、超濾、乙醇沉淀、離心和冷凍干燥,制得粗酶粉的酶活約為1 033 U/ g. 對粗酶研究發現,該酶的最適反應溫度為52 ℃,最適pH 為6. 0 ;粗酶的pH 穩定范圍在4～8 ,溫度穩定范圍在20～40 ℃,離子強度對該酶的活性稍有影響. 粗酶經CM2纖維素層析和Sephadex G275 凝膠過濾層析后得到較純的酶,通過SDS2聚丙烯酰胺凝膠電泳檢驗蛋白質純度,得到較弱的單一區帶. 其中,CM2纖維素層析的純化倍數為4. 5 ,收率質量分數約為78. 8 %;凝膠過濾層析純化倍數為1. 11 ,收率質量分數為50 %;用凝膠過濾法測得谷氨酰胺轉胺酶的相對分子質量為40 092。