幽門螺桿菌Omp222HpaA融合基因工程菌蛋白的表達

摘要　目的:優化幽門螺桿菌Omp222HpaA基因工程菌pMAL2c2X2Omp222HpaA2TB1的表達條件,并對其表達產物進行純化和鑒定。方法:在不同誘導時機、不同誘導劑( IPTG)濃度和不同誘導時間條件下誘導pMAL2c2X2Omp222HpaA2TB1的表達,測定目的蛋白的表達量。在優化條件下誘導工程菌表達,并應用SDS2PAGE方法對表達產物進行分析,采用Amyloss樹脂預裝柱對可溶性Omp222HpaA蛋白進行分離、純化,對純化后的蛋白行Western blot分析。結果:工程菌培養2 h時加入IPTG(終濃度為0. 4 mmol/L)誘導7 h,目的蛋白Omp222HpaA表達量達到菌體總蛋白的20%以上。經純化得到了較高純度( > 90% )的目的蛋白,并具有良好的免疫原性。結論:建立了從pMAL2c2X2Omp222HpaA2TB1可溶性表達產物中純化較高純度Omp222HpaA融合蛋白的方法。