產氣腸桿菌EAM2Z1 尿苷磷酸化酶的分離純化及性質研究

摘　要:從產氣腸桿菌( Enterobacter aerogenes) 突變株EAM2Z1 中分離出一種具有較高轉移酶活性的尿苷磷酸化酶(UPase) 。經測定這種Upase 的分子量為12. 8 ×104 ,亞基分子量為4. 3 ×104 ,由3 個同型亞基組成。N 端氨基酸序列為:MRMVDLIATKRDGGE。等電點為4. 46。對尿苷的Km為0. 29mmolPL。酶反應最適pH為7. 8 ,最適溫度為50 ℃。該酶能磷酸化尿苷、胸苷、52氟尿苷、2′2 脫氧252氟尿苷及尿嘧啶2β2D2阿拉伯呋喃糖,且具有較高的轉移酶活性,能將尿苷和52氟尿嘧啶轉化成52氟尿苷(一種抗癌藥物的中間體) ,其轉化率為47 %。該酶的這些特性對于酶法合成核苷類抗腫瘤藥物和抗病毒藥物是十分有用的。