鼻咽癌組織與正常鼻咽上皮組織的差異磷酸化蛋白質組分析

[摘要] 　目的:比較鼻咽癌( nasopharyngeal carcinoma, NPC)組織與正常鼻咽上皮組織磷酸化蛋白質組差異,篩選差異磷酸化蛋白質,為揭示NPC的發病機制提供依據。方法:采用雙向凝膠電泳技術(22DE)分離NPC組織與正常鼻咽上皮組織的總蛋白質,蛋白質轉膜后與抗酪氨酸磷酸化抗體進行Western印跡分析,圖像分析識別差異磷酸化蛋白質點,電噴霧2四極桿2串聯質譜( ESI2Q2TOFMS/MS)鑒定差異的酪氨酸磷酸化蛋白質,采用NetPhos軟件預測蛋白質的酪氨酸磷酸化位點,并采用生物信息學方法對差異磷酸化蛋白質的功能和亞細胞定位進行分析。采用Western印跡檢測差異蛋白質(phosphatidylethanolamine2 binding p rotein 1)在正常鼻咽黏膜組織和鼻咽癌組織的總蛋白質中的磷酸化水平。結果:建立了NPC組織與正常鼻咽上皮組織的酪氨酸磷酸化蛋白質表達譜,識別了25個差異酪氨酸磷酸化蛋白質,共鑒定了13個差異酪氨酸磷酸化蛋白質,其中7個蛋白質的酪氨酸磷酸化水平在NPC組織中增強,而6個蛋白質的酪氨酸磷酸化水平降低。NetPhos軟件預測和生物信息學分析結果顯示, 13個差異蛋白質均存在酪氨酸磷酸化位點,其功能涉及物質代謝、細胞結構、細胞防御以及信號轉導。與正常鼻咽黏膜組織相比較,差異蛋白phosphatidylethanolamine2binding p rotein 1在鼻咽癌組織中磷酸化表達水平下調。結論: 鑒定了13個可能與NPC發病相關的酪氨酸磷酸化蛋白質,為揭示NPC發病機制提供了科學論依據。