構建高產谷胱甘肽啤酒酵母基因工程菌提高啤酒抗老化能力的研究

摘　要　根據同源重組的原理,將來源于啤酒酵母工業菌株G03 的γ2谷氨酰半胱氨酸合成酶基因( GSH1) 和篩選標記Kan 取代質粒pRJ25 中18S rDNA 內部約340bp 的DNA 片段,構建重組質粒pRKG。以pRKG為模版,PCR 得到以18S rDNA 為整合位點包含GSH1 和Kan 的基因片段18S rDNA: : ( Kan2GSH1) 。用此片段轉化啤酒酵母工業菌株G03 ,通過G418 抗性篩選得到啤酒酵母工程菌。實驗室小試表明,工程菌的谷胱甘肽含量比受體菌株提高1616 % ,啤酒的抗老化能力得到了顯著提高,而常規指標沒有發生顯著變化。連續傳代5 次后胞內GSH含量基本不變遺傳穩定性良好。由于表達γ2谷氨酰半胱氨酸合成酶的基因來源于受體菌株自身,是通過自克隆技術改造工業啤酒酵母的一次有益的嘗試。