重組可溶性TRAIL在大腸桿菌中的表達_分離純化及其誘導腫瘤細胞凋亡活性的研究

本項研究建立了高效穩定表達可溶型 TRAIL重組融合蛋白的工程菌 ,并進行了該重組融合蛋白的表達、分離純化及誘導腫瘤細胞凋亡活性的研究。結果:重組融合蛋白在大腸桿菌中的表達產量可達到菌體總蛋白的 30%左右 ,親和層析純化后 ,重組融合蛋白的純度可達95%以上。其表現分子量約為22kD,等電點為6129,N- 末端的氨基酸順序與理論值相同。該融合蛋白在濃度為011～1g/mL 時 ,能顯著誘導所試全部 7 種腫瘤細胞株細胞凋亡 ,不能誘導正常鼠成纖維細胞細胞凋亡;對賁門癌、乳腺癌、惡性胸腺瘤等原代細胞也具有很強的殺傷作用 ,但不殺傷正常人外周血淋巴細胞;動物實驗研究表明 ,能顯著抑制人肝癌細胞在裸鼠體內生長 ,而對正常小鼠無任何毒性。結論:該重組融合蛋白能特異性地誘導腫瘤細胞凋亡 ,具有重要臨床應用前景。