高滲漏型AspAT 基因工程菌誘導表達的研究

摘　要　利用異丙基- β- d - 硫代半乳糖苷( IPTG) 誘導有高滲漏表達現象的天冬氨酸轉氨酶(AspAT) 工程菌,研究是否可以在這一類基因工程菌中提高酶的產量及活性。在觀察IPTG誘導后菌體生長的同時,觀察不同的時間及條件下酶活性的變化,發現插入含有天冬氨酸轉氨酶基因(AspC ,112kb) 的pUC18 質粒的BL21 (DE3) 在較高滲漏表達的情況下,用IPTG37 ℃誘導培養8 h后酶表達開始升高,12 h后趨于穩定表達;同時發現用011mmol/ L IPTG誘導后酶的活性提高最多,比未誘導前提高一倍以上。研究認為如果培養條件恰當這類菌應該可以用IPTG誘導高效表達目的酶蛋白。