HCV患者外周血單個核細胞蛋白質表達質譜分析

[摘要] 　目的: 應用比較蛋白質組學的方法分析丙型肝炎患者外周血單個核細胞蛋白質表達模式的變化及尋找丙型肝炎相關生物標記分子, 進一步識別鑒定其差異表達蛋白質, 分析其對丙型肝炎慢性化機制的意義。方法: 應用固相化pH梯度雙向凝膠電泳(22DE)分離健康者(10)及HCV患者(28)PBMC的總蛋白質, 凝膠銀染顯色后, PDQuest圖像分析軟件進行比較分析、識別差異表達的蛋白質, 應用基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(MALD I2TOF2MS)獲得差異蛋白點的肽質指紋圖譜, 通過SW ISS2PROT數據庫鑒定蛋白質。結果:得到兩張22DE圖譜, HCV患者及健康者PBMC凝膠的蛋白質點數分別為625及614; 初步篩選出HCV患者與健康者存在明顯差異的12個蛋白點, 經質譜分析,初步鑒定了10種蛋白質。這些差異蛋白質包括病毒蛋白、蛋白質合成與分解、三大代謝相關酶類、細胞結構相關蛋白質以及信號轉導相關蛋白質。結論: 應用22DE 及MALDI2TOF2MS方法建立了HCV患者PBMC雙向凝膠電泳圖譜,分離并初步鑒定了10種與HCV感染相關的差異表達的蛋白質, 為研究HCV慢性化相關機制提供新的線索。