蛋白質組學技術篩選與鑒定鯉魚嗅腦急性創傷后的應激蛋白質

《分析化學》2008年04期 
 
  蛋白質組學技術篩選與鑒定鯉魚嗅腦急性創傷后的應激蛋白質
  包曉東;黃琳;黃河清;蔡宗葦
  　　優化建立鯉魚(cyprinus carpio,CC)嗅覺端腦(嗅腦)全蛋白提取技術。聯用低滲透裂解和液氮凍溶法破碎鯉魚嗅腦組織(rhinencephalon tissue of cyprinus carpio,CCRT)、低速離心提取CCRT全蛋白,并采用雙向凝膠電泳(2D-PAGE)技術進行有效分離。經分析與統計,每張CCRT的2D-PAGE圖譜中的蛋白質斑點數目約為1200個。分別分離CCRT的脂溶性和水溶性全蛋白,并獲得高分辨率的2D-PAGE圖譜。選用差異蛋白質組學技術篩選經10%冰醋酸創傷后的CC,其端腦組織所表達出的6種應激蛋白質,并用肽質量指紋譜(peptide mass fingerprinting,PMF)和數據庫檢索技術給予鑒定。其中3種蛋白質為70S熱休克蛋白、β微管蛋白和DNA鏈接酶IV,有望作為研究大腦急性創傷后的應激修復途徑和機理的指示蛋白質。
【作者單位】：廈門大學生命科學學院細胞生物學與腫瘤細胞工程教育部重點實驗室;廈門大學生命科學學院細胞生物學與腫瘤細胞工程教育部重點實驗室;廈門大學生命科學學院細胞生物學與腫瘤細胞工程教育部重點實驗室;香港浸會大學化學系 廈門361005廈門大學化學化工學院固體表面物理化學國家重點實驗室;廈門361005;廈門361005廈門大學化學化工學院固體表面物理化學國家重點實驗室;廈門361005;廈門361005廈門大學化學化工學院固體表面物理化學國家重點實驗室;廈門361005廈門大學化學生物學福建省重點實驗室;廈門361005;香港
【關鍵詞】：鯉魚嗅腦;蛋白質組學;創傷;應激蛋白質;優化提取與分離
【基金】：國家自然科學基金(No.40776060);廈門大學預研基金(No.xdkicx20051009)資助項目
【分類號】：Q51
【DOI】：CNKI:SUN:FXHX.0.2008-04-005
【正文快照】：
　　1引言嗅覺神經通路是一個較為特殊的感覺通路,從感覺神經元到中樞神經期間的聯系不經過血腦屏障,使得外源物質有可能通過這條通路快速到達腦部。利用嗅覺神經通路實現向中樞神經快速供藥是目前神經藥物科學發展的熱點與難題之一。蛋白質組學已經逐漸演變成研究大腦中樞神經系統