液相等電聚焦結合乙酰化標記在比較蛋白質組學中的應用

《分析化學》2008年04期    
 
  液相等電聚焦結合乙酰化標記在比較蛋白質組學中的應用
  李娜;楊芃原
  　　建立了液相等電聚焦,一維電泳分離以及肽段乙酰化同位素標記的新技術,此技術在1∶5~5∶1范圍內具有較好的動態范圍(誤差小于20%)。本方法不僅可以提高比較蛋白質組分離的通量,并有助于低豐度差異蛋白中的檢出;并成功應用于正常肝臟與癌變肝臟組織的低豐度、偏堿性蛋白的差異比較蛋白質組分析,鑒定出16種差異蛋白,結果令人滿意。
【作者單位】：復旦大學化學系 上海200433
【關鍵詞】：液相等電聚焦(LIEF);一維凝膠電泳;乙酰化標記;蛋白質組學
【基金】：國家自然科學基金(No.90408023);國家科技攻關計劃(No.2004BA711A18)資助項目
【分類號】：Q51-3
【DOI】：CNKI:SUN:FXHX.0.2008-04-009
【正文快照】：
　　1引言目前2DE-MS技術是比較蛋白質組學的主要分析方法,但它存在著一定的局限性。2-DE不能有效地分離檢測極堿極酸性、疏水性、分子量特大或特小及低豐度蛋白等[1]。采用預分離方法處理樣品是一種有效的改善措施[2~4]。液相等電聚焦技術(LIEF)是降低樣品復雜性并同時富集低豐度