作者:楊俊,劉暉,王亞
[摘要]目的:建立測定血漿中順鉑含量的方法。方法:將血漿在1000r/min離心10min后,取上清液,采用石墨爐原子吸收分光光度法測定順鉑的含量。結果:人血漿中順鉑的回收率為94.7%～103.70%。結論:該方法為一種可信度較高、操作性較強的血漿順鉑的測定方法。
順鉑(CDDP)是一種鉑的金屬絡合物,是20世紀70年代上市的一種臨床有高度抗癌活性的藥物,在臨床上已得到廣泛的應用。大劑量順鉑為主的聯合化療,對于手術、放療或化療后復發和轉移的患者有較好的療效,但其嚴重的腎毒性反應,限制了該藥的使用。因此,測定血漿中鉑的濃度很有必要,可為臨床合理用藥提供理論依據。用石墨爐原子吸收分光光度法測定生物樣品中鉑的濃度,相對高效液相色譜法(HPLC法)、電鏡法,其方法特異性高,準確,迅速,簡便。
1 儀器與試劑
1. 1 儀器 I28000原子吸收分光光度計, HL-1空心陰極燈,熱解涂層石墨管(日本島津) ,微量進樣器,高速離心機.
1. 2 試劑 順鉑(齊魯制藥廠)、非離子性界面活性劑Triton X-100(日本Nacalax Fesque公司生產,批號: L010909)、血漿(陜西省血站提供)、鋼瓶純氬(含量>99.99% )
2 方法與結果
2. 1 測試條件 選用石墨爐原子吸收分光光度計,工作電流15mA,波長265.9nm,狹縫0.4nm,載氣為氬氣,流量200mL/min,間斷載氣流量30mL/min,檢測信號(P/H)峰高,手動進樣,進樣量為10μL。
2. 2 石墨爐升溫程序
2. 3 標準曲線的繪制 取順鉑,加純化水溶解,分別配制成20.0, 10.0, 2.0, 1.0, 0.4μg/mL,依次用血漿1 ∶1稀釋,即得順鉑標準溶液。每個標準點測3次,取平均值作曲線,結果表明,在測定范圍0.2～10.0μg/mL,線性關系良好,回歸方程為Y=0.0476X + 0.00715, r=0.9999。
2. 4 樣品處理 取血漿3mL于肝素化的離心管中,取腹腔積液3mL于離心管中, 1000 r/min離心10min,取上清液用0.25% TritonX2-00溶液按1 ∶1稀釋,振搖均勻后進樣測定。
2. 5 回收率實驗 取不含鉑血漿,定量加入順鉑,按上述條件測定,其回收率.
3 討論
在順鉑的原子吸收測定中,使用二步升溫干燥樣品和三步升溫使樣品灰化,以防濺和損失,同時采用靈敏度高的熱解涂層石墨管,使測定中靈敏度和重現性都有一定改善。
順鉑可采用腹腔注射給藥方式,可同時采集腹腔積液輔助觀察療效。一般腹腔積液中順鉑濃度越高,血漿中濃度越低,則說明局部吸收多,對腎臟、骨髓的不良反應小,療效越好。順鉑在體內消除十分緩慢,幾乎所有患者均發生腎毒性。因此,建立鉑含量測定十分必要,其檢測方法有HPLC、電鏡等,也有用原子吸收分光光度計來檢測。但以原子吸收分光光度計法測定優點最多,適用臨床藥物濃度檢測。
[參考文獻]
[1]張玫,周際昌,藉秀娟.順鉑的臨床藥動學研究[J].中華腫瘤學雜志,1992,14(11):672.
[2]李文鈞,鄭永興,李延福,等.石墨爐原子吸收法測定體內順鉑[J].藥物分析雜志,1992,8(5):122.