【摘要】目的:控制柚枳實的質量。方法:紫外分光光度法;檢測波長284nm。結果:柚皮苷在5.0—30.0μg/ml范圍內。濃度與吸收度呈良好的線性關系,回歸方程:C=31.81A一0.0004,r=0.9997;平均回收率:100.6%,RSD=0.67%。結論:操作簡便,結果準確,適用于原料質量控制。
柚枳實為蕓香科植物柚Citrus grandis(L.)Osbeck干燥幼果,產地主要是廣西、陜西、四川、江西等地。柚枳實主含柚皮苷(Naringin)、枳屬苷(Poncirin)等,其中柚皮苷除具有抗炎、抗菌、抗病毒、抑制眼醛糖還原酶等作用外,同時也是制備新型甜味劑——柚苷二氫查耳酮的主要原料,現已廣泛應用。為控制其質量,本實驗對柚枳實進行柚皮苷的含量測定。
1.儀器與試藥
儀器日本島津UV-2401PC型紫外分光光度計;柚皮苷對照品(批號:0722—200108中國藥品生物檢定所)。乙醇為分析純;柚枳實的產地是廣西。
2.方法與結果
2.1對照晶及供試晶溶液的制備
對照品溶液的制備:取柚皮苷對照品2Omg(120℃干燥至恒重)精密稱定,置lOOml量瓶中。加乙醇適量溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備:精密稱取2.Og柚枳實細粉。置索氏提取器中,加乙醇回流1.5小時,溶液于水浴上蒸干,殘留物精加乙醇lOOml使溶解后,過濾,棄去初濾液。精密吸取續濾液lml,置lOOml量瓶中,加乙醇至刻度,精密吸取lOml,置50ml量瓶中,加乙醇至刻度。即得。
2.2測定波長的選擇
對照品溶液及供試品溶液在200~40Onm進行掃描。均在226nm和284nm處有最大吸收峰,現選擇284nm作為檢測
波長。
2.3線性關系的考察
精密吸取上述對照品溶液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0ml,分別置于25ml量瓶中,用乙醇稀釋至刻度,搖勻。在284nm處測定吸收度。得回歸方程C=31.81A一0.0004,r=0.9997(n=6)。結果表明,柚皮苷在5.0~30.Oμg/ml范圍內,濃度與吸收度呈良好的線性關系。
2.4回收率試驗
精密稱取柚皮苷對照品適量,加乙醇溶解并稀釋,配成不同濃度的溶液。精密吸取本品5ml,置50ml量瓶中,用乙醇稀釋至刻度,搖勻。以乙醇為空白,在284nm波長處測定吸收度。
2.5精密度試驗
取一定濃度的供試品溶液,測定吸收度,RSD為0.54%(n=5)。表明本法精密度良好。
2.6重現性考察
取同一批樣品,按樣品制備方法平行制備5份,依法測定,平均含量為13.28%,RSD為0.53%,表明重現性良好。
2.7穩定性試驗
取上述對照品溶液及供試品溶液于室溫分別放置0,2,4,6,8小時后,測定吸收度,結果表明,本品溶液室溫條件下在8小時內吸收度無變化。
2.8供試品測定
取供試品溶液于284nm處測定吸收度,計算供試品含量。
3.討論
3.1中國藥典(2000年版)一部枳實項下測定柚皮苷含量是以甲醇為溶劑,而本實驗采用的是乙醇,結果柚皮苷在乙醇中穩定性好,避免了甲醇對人體的侵害。
3.2實驗結果表明,用紫外分光光度法測定柚枳實中柚皮苷的含量,具有時間短、操作簡便及結果準確等優點,適用于企業原料質量控制。