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  • 紫外分光光度法測定半邊旗二萜類化合物5F滴眼液的含量

    上一篇 / 下一篇  2008-08-30 20:03:34/ 個人分類:實驗技術

    摘要 目的:建立半邊旗二萜糞化合物5F滴眼液的含量測定方法。方法:采用紫外分光光度法測定滴眼液中5F的含量,檢測波長為242nm。結果:線性范圍為20~100μg/mL(r=0.9994),日內、日間RSD為1.0%~2.0%,平均回收率為100.6%。結論:紫外分光光度法專屬性好,操作簡便,能準確檢測出滴眼液中5F的含量。

    Determination of a Diterpenoid Compound 5F in Eye Drops by Ultraviolet Spectrophotometry

    Nan,Wu Kefeng,Li Baohong,Liang Nianci

    Abstract Objective:To establish an ultraviolet spectrophotometry method for determination of a diterpenoid compound ent-11 α-hydroxy-15oxo一kaur-16-en-19-orc acid (5F) in eye drops.Methods:The content of 5F in eye drops was determination by ultraviolet spectrophotometry. 5F was detected in wavelength 242nm、Results:The linear range of 5F was over 20~100 μg/mL with a correlation coeficient of 0.9994.The precision within-day and between-day were 1.0%~2.0%,the average recovery of 5F was 100.6%、Conclusion:This method is simple,accurate and suitable for determination of 5F in eye drops.

    半邊旗系鳳尾蕨科植物,民間用于治療外傷出血、跌打損傷、目刺腫痛等。本課題組研究發現半邊旗提取物具有抗腫瘤活性;最近有研究報道,半邊旗提取物中ent-llα-hydroxy-l5oxo-kaur-16-en-19-ore acid(簡稱5F)對體外培養的人翼狀胬肉成纖維細胞具有抑制作用,因此考慮將其制備成滴眼液。由于5F在水中溶解度很小,而其結構中含有1個羧基,因此考慮用氫氧化鈉溶解,制備成水溶性鈉鹽。筆者首次建立了將半邊旗二萜類化合物5F制成鈉鹽后的定量測定方法。

    1 材料和方法

    1 1 儀器和試劑

    752型紫外-可見分光光度計(上海第一儀器廠);UV-3101 PC紫外掃描儀(日本島津);S-320 pH計(梅特勒一托利多上海有限公司);5F參照品(由本研究室鄧亦峰老師提供);其余試劑均為分析純。

    1.2 配制方法

    精密稱取5F參照品,用2%的氫氧化鈉溶液溶解后,加入pH為8.98的硼酸鹽緩沖液,用微孔濾膜過濾,加水至刻度,制成濃度為2.5 mg/mL的5F溶液。

    2 結果

    2 1 紫外吸收光譜

    取5F參照品按1.2項下方法配制溶液,進行紫外掃描,最大吸收波長為242nm,在200~400nm波長范圍內輔料未見有吸收。

    2.2 標準曲線的制備

    精密稱取5F參照品,用2%的氫氧化鈉溶液溶解,加入pH為8.98的硼酸鹽緩沖液,配成濃度為2.5 mg/mL的貯備液;吸取貯備液,用蒸餾水稀釋成20,40,60,80,1O0 μg/mL系列濃度的對照品溶液,在242nm波長處測定吸收度。以吸收度(A)為縱坐標,對應濃度(C)為橫坐標繪制標準曲線,得回歸方程為:A=0.0347+0.0l392C(r=0.9994)。該方法在20~100μg/mL范圍內呈良好線性關系。

    2.3 日內、日間精密度試驗

    按2.2項下方法配制3種濃度的5F溶液,測定日內、日間精密度。

    2.4 回收率試驗

    精密稱取一定量的5F,用2%的氫氧化鈉溶液溶解,加入pH為8.98的硼酸鹽緩沖液,配成濃度為2.5 mg/mL供試品液備用。吸取該供試品液1mL,置50mL容量瓶中,再加入5F參照品1mg,用pH為8.98的硼酸鹽緩沖液稀釋至刻度,搖勻,在242nm波長處測定吸收度,代人回歸方程計算結果。

    2.5 樣品含量測定

    按1.2項下方法,配制6份濃度為2.5 mg/mL的樣品,分別以三蒸水稀釋50倍,在242nm波長處測定吸收度,計算含量。

    3 討論

    5F在242nm波長處有最大吸收,而其他成分在所選波長處無吸收,說明對測定無干擾。本法操作簡便,有較好的精密度和回收率,可用于直接測定5F鈉鹽的含量。

    參考文獻:

    [1]崔燎,梁念慈.半邊旗體內外抗癌作用及急性毒性研究[J].中藥材,1996,19(1):29—32.

    [21張曉,崔燎,田中信壽,等.半邊旗有效成分及抗腫瘤活性研究[J].中國藥學雜志,1997,32(1):37—38.

    [3]李金華,梁念慈,莫麗兒,等.半邊旗5種成分體外細胞毒活性比較及構效關系分析[J].藥學學報,1998,33(9):641—644.

    [4]王映芬,陳毓東.半邊旗二萜類化合物5F對人翼狀胬肉成纖維細胞增殖的抑制作用[J].中國中醫眼科雜志,2002,12(2):74—78.

    [5]畢殿洲.藥劑學[M]、第4版.北京:人民衛生出版社,2000:369—377


    TAG: 含量二萜類5f滴眼液

     

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