維生素B4原料及片劑均收載于衛生部藥品標準中，含量測定一直采用凱氏定氮法，該方法較為繁瑣費時。維生素現在紫外區有吸收，且已用于原料藥的鑒別，但尚未見用于測定片劑含量的報道。我們試用紫外分光光度法測定維生素B4片的含量，方法簡便、可靠。
1 儀器、試劑與藥品
L‘V一265紫外分光光度計(日本島津)，維生素B4對照品(浙江海正藥業有限公司生產，經重結晶處理后，凱氏定氮法測得含量為99.5%)，維生素 片(浙南藥業有限公司)，鹽酸及其它試劑均為分析純。
2 實驗方法與結果
2 1方法取維生素 對照品，用0.02mol/L鹽酸溶液制成濃度約為1ml的溶液，以0.02mol/L鹽酸溶液為空白，在
200～30Onm的波長范圍內掃描，在262±1nm的波長處有最大吸收，與標準規定一致。另取維生素B4片處方量的各輔料適量.用0.02mol/L鹽酸溶液制成空白對照溶液，在200～300nm的波長范圍內掃描，結果表明輔料僅在末尾段有少量吸收，而在262nm附近沒有吸收，散將262±1nm波長作為測定波長。
2.2 線性關系 精密稱取維生素B4對照品約20mg，置lOOml容量瓶中，加0.02mol/L鹽酸溶液使維生素B4溶解，并加至刻度，搖勻。精密吸取上述溶液1、2、3、4、5ml，分別置50Inl量瓶中.加0.02mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，以0.02mol/L鹽酸溶液為空白，求得回歸方程為：Y=l7.470 A一0.1845.r=0.9999。結果表明維生素B4濃度4—20μg/ml范圍內與吸收度呈良好的線性關系。
2.3 回收率試驗 精密稱取105℃干燥恒重的維生素 對照品約5Omg共5份，置100mL量瓶中，分別加人處方量的各輔料.制成模擬維生索B4片，加0.02mol/L鹽酸溶液適量，振搖使維生索 溶解，加0.02mol/L鹽酸溶液至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續濾液2ml，置lOOml量瓶中，加O.02mol/L鹽酸溶液至刻度，搖勻，在262±1nm的波長測定吸收度(A).根據回歸方程求出濃度并計算回收率。
2.4 穩定性試驗取上述測定溶液，在室溫避光情況下放置4h.每隔1h測定1次，吸收度基本不變。
2.5 樣品的測定取維生素B4片20片，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當于維生素B4 20mg)，置100ml量瓶中，同時精密稱取經l05℃干燥至恒重的維生素B4對照品約50mg，置lOOml量瓶中，分別加0.02mol/L鹽酸溶液使溶解，照回收率試驗項下的方法測定吸收度(A)，根據兩者的比值計算出相當于維生素既標示量的百分含量。同時與凱氏定氮法測得的結果比較。
2.6 重復牲試驗取同一批樣品，按“樣品測定”項下取樣5份，進行測定。結果平均含量為94.3% ，RSD=0.20% (n=5)。
3 小結
從以上結果可知，用紫外分光光度法測定維生素凰片的含量，與用凱氏定氯法測得的結果基本一致，但與費時費事的凱氏定氮法比較，紫外分光光度法具有儀器要求簡單、操作簡便、快速的優點，可以推廣使用。