ASTM E2186-02a(2016)
使用彗星試驗測定真核細胞中DNA單鏈損傷的標準指南
Standard Guide for Determining DNA Single-Strand Damage in Eukaryotic Cells Using the Comet Assay
- 標準號
- ASTM E2186-02a(2016)
- 發布
- 2002年
- 發布單位
- 美國材料與試驗協會
- 替代標準
- ASTM E2186-02a(2023)
- 當前最新
- ASTM E2186-02a(2023)
- 引用標準
- ASTM E1706 ASTM E1847
- 適用范圍
- 1.1 彗星測定可輕松用于收集 DNA 鏈斷裂的數據 (9,25,26)。它是一種簡單、快速且靈敏的方法，可以比較不同細胞群中的 DNA 鏈損傷。如本指南中所述，該測定有助于檢測單個細胞中的 DNA 單鏈斷裂和堿性不穩定位點，并可以確定它們相對于對照或參考細胞的豐度 (9,16,26)。該檢測具有許多優點；測量單個細胞中 DNA 的損傷，只需采樣極少量的細胞即可進行測定（<108201;000），該測定幾乎可以在任何真核細胞類型上進行，并且已在比較研究是檢測 DNA 損傷的非常靈敏的方法 (2, 27) 。
5.1.2 這些是一般準則。該測定有多種程序變體。使用的變化取決于所檢查的細胞類型、感興趣的 DNA 損傷類型以及進行檢測的實驗室的成像和分析能力。為了使 DNA 可視化，可以用熒光染料對其進行染色，或者為了進行光學顯微鏡分析，可以對 DNA 進行銀染 (28)。本指南僅描述熒光染色方法。 DNA 遷移的顯微測定可以使用目鏡測微儀通過肉眼進行，也可以使用圖像分析軟件進行。可以使用校準的目鏡測微計或根據遷移程度將細胞分為四到五類來進行肉眼評分 (29, 30)。圖像分析系統由連接到熒光顯微鏡的 CCD 相機以及專門設計用于捕獲和分析熒光染色細胞核圖像的軟件和硬件組成。使用這樣的......
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