ASTM E2186-02a(2016)
使用彗星試驗測定真核細胞中DNA單鏈損傷的標準指南
Standard Guide for Determining DNA Single-Strand Damage in Eukaryotic Cells Using the Comet Assay
- 標準號
- ASTM E2186-02a(2016)
- 發布
- 2002年
- 發布單位
- 美國材料與試驗協會
- 替代標準
- ASTM E2186-02a(2023)
- 當前最新
- ASTM E2186-02a(2023)
- 引用標準
- ASTM E1706 ASTM E1847
- 1.1 彗星測定可輕松用于收集 DNA 鏈斷裂的數據 (9,25,26)。它是一種簡單、快速且靈敏的方法，可以比較不同細胞群中的 DNA 鏈損傷。如本指南中所述，該測定有助于檢測單個細胞中的 DNA 單鏈斷裂和堿性不穩定位點，并可以確定它們相對于對照或參考細胞的豐度 (9,16,26)。該檢測具有許多優點；測量單個細胞中 DNA 的損傷，只需采...
ASTM E2186-02a(2016)相似標準
推薦
BioTek應用大揭秘: Comet assays也能實現高通量檢測
圖2，Comet Assay規格及Cytation對應適配器圖3，Cytaiton自動化成像系統對2-well，3-well和96well規格的CometAssay樣品成像結果。可以看出，上排DNA無斷裂損傷的樣品，每個細胞呈現圓形，而有DNA損傷的樣品則有明顯的彗星狀拖尾。????得到了清晰的圖像之后，如果需要測定DNA損傷的情況，就必須要進行精確的圖像分析。...
彗星試驗原理及注意事項（一）
中性彗星實驗主要用于檢測DNA雙鏈的斷裂損傷，堿性彗星實驗具有更高的靈敏性，可用于檢測更少量的單鏈和雙鏈斷裂損傷。需要注意的是，試驗過程中的個方面，包括樣品準備、電泳條件、視覺分析參數(如染色強度、顯微鏡光強度以及使用顯微鏡濾鏡和相機動態和環境條件(如背景照明)已經被研究，可能影響DNA遷移。?...
單細胞凝膠電泳分析（single cell gel eletrophoresis，SCGE）
如果在堿性電泳液（pH>13）中，先是DNA雙鏈解螺旋且堿變性為單鏈，單鏈斷裂的碎片分子量小可進入凝膠中，電泳時斷鏈或碎片離開核DNA向陽性遷移，形成拖尾。細胞DNA受損愈重，產生的斷鏈或堿易變性斷片就愈多，其斷鏈或斷片也就愈小，在電場作用下遷移的DNA量多，遷移的距離長，表現為尾長增加和尾部熒光強度增強，因此，通過測定DNA遷移部分的光密度或遷移長度可定量地測定單個細胞DNA損傷的程度。...
染色體分析系統介紹
(2)測定DNA損傷程度和細胞殺滅效應之間的關系 最近，用“彗星”法分析人體腫瘤多細胞球體和實驗動物腫瘤的結果顯示，初始DNA損傷的量化測定可能成為評價細胞殺滅效應的指標。結果亦顯示腫瘤細胞具有修復DNA損傷的能力，而細胞修復損傷的能力被認為是判斷同樣打擊條件下，不同細胞存活程度的另一重要依據。...