當實驗中途停止或結束時，實驗者應站在實驗動物的立場上以人道的原則去處置動物，原則上不給實驗動物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安樂死。安樂死是指實驗動物在沒有痛苦感覺的情況下死去。實驗動物安樂死方法的選擇取決于動物的種類與研究的課題。

一、蛙類

常用金屬探針插入枕骨大孔，破壞腦脊髓的方法處死。將蛙用濕布包住，露出頭部，左手執蛙，并用食指按壓其頭部前端，拇指按壓背部，使頭前俯；右手持探針由凹陷處垂直刺入，刺破皮膚即入枕骨大孔。這時將探針尖端轉向頭方，向前深入顱腔，然后向各方攪動，以搗毀腦組織。

再把探針由枕骨大孔刺入并轉向尾方，刺入椎管，以破壞脊髓。腦和脊髓是否完全破壞，可檢查動物四肢肌肉的緊張性是否完全消失。拔出探針后，用一小干棉球將針孔堵住，以防止出血。操作過程中要防止毒腺分泌物射入實驗者眼內。如被射入時，則需立即用生理鹽水沖洗眼睛。

二、大鼠和小鼠

1 、頸椎脫臼法

右手抓住鼠尾用力向后拉，同時左手拇指與食指用力向下按住鼠頭。將脊髓與腦髓拉斷，鼠便立即死亡。

2、斷頭法

用剪刀在鼠頸部將鼠頭剪掉，鼠立即死亡。

3、擊打法

右手抓住鼠尾提起，用力摔擊其頭部，鼠痙攣后立即死去。或用木錘用力擊打鼠頭部也可致死。

4、 急性大出血法

可采用鼠眼眶動脈和靜脈急性大量失血方法使鼠立即死亡。

5、. 藥物致死法

吸入一定量的一氧化碳、乙醚、氯仿等均可使動物致死。

三、狗、兔、豚鼠

1 、空氣栓塞法

向動物靜脈內注入一定量的空氣，使之發生栓塞而死。當空氣注入靜脈后，可在右心隨著心臟的跳動使空氣與血液成泡沫狀，隨血液循環到全身。如進到肺動脈，可阻塞其分支，進入心臟冠狀動脈，造成冠狀動脈阻塞，發生嚴重的血液循環障礙，動物很快致死。一般兔、貓等靜脈內注入20～40ml空氣即可致死。每條狗由前肢或后肢皮下靜脈注入80～150ml空氣，可很快致死。

2、急性失血法

先使動物輕度麻醉，如狗可按每公斤體重靜脈注射硫噴妥納20～30mg，動物即很快入睡。暴露股三角區，用鋒利的殺狗刀在股三角區作一個約10cm的橫切口，把股動、靜脈全切斷，立即噴出血液。

用一塊濕紗布不斷擦去股動脈切周圍處的血液和血凝塊，同時不斷的用自來水沖洗流血，使股動脈切口處保持暢通，動物3～5分鐘內即可致死。采用此種方法，動物十分安靜，對臟器無損傷，對活殺采集病理切片標本是一種較好的方法。

3、 破壞延腦法

如果急性實驗后，腦已暴露，可用器具將延髓破壞，導致動物死亡。對家兔也可用木錘用力錘擊其后腦部，損壞延腦，造成死亡。

4 、開放性氣胸法

將動物開胸，造成開放性氣胸。這時胸膜腔的壓力與大氣壓力相等，肺臟因受大氣壓縮發生肺萎陷，縱隔擺動，動物窒息而死。

5、化學藥物致死法

靜脈內注入一定量的氯化鉀溶液，使動物心肌失去收縮能力，心臟急性擴張，致心臟馳緩性停跳而死亡。每條成年兔由兔耳緣靜脈注入10％氯化鉀溶液5～10ml；每條成年狗由狗前肢或后肢下靜脈注入20～30ml。即可致死。

靜脈內注入一定量的福爾馬林溶液，使血液內蛋白凝固，動物由于全身血液循環嚴重障礙和缺氧而死。每條成年狗靜脈注入10%福爾馬林溶液20ml即可致死。也可將福爾馬林與酒精按一定比例配成動物致死液應用。