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    各種組織特殊染色法—彈性纖維染色

    關鍵詞: 組織 染色法 彈性纖維來源: 互聯網

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    彈性纖維主要由彈性蛋白(一種黃色硬蛋白,它是黃色彈性纖維組織的主要成分,干燥時易脆,而濕潤時呈彎曲并富彈性)構成。它廣泛分布于全身的各個部位,尤以循環系統,呼吸系統和皮膚系統為甚。新鮮時它呈黃色,固又稱為黃色纖維。彈性纖維較細,直徑0.2-1.0um,有分支,不成束。但可交織成網。它富有彈性,容易拉長,但不能拉到超過它的極限,外力除去后又恢復原狀。彈性纖維與膠原纖維交織在一起,在HE染色 的標本上,含量少時不易與膠原纖維區別,含量多時呈折光性強的淡粉紅色。由彈性蛋白構成彈性纖維的鞘,并非完全的密封,在其周圍有許多微細孔,這些微細孔可作為營養物及排除廢物的場所。 彈性纖維主要來源于帶有平滑肌特征的間胚葉細胞 ,少量可由脈管的內皮細胞產生,先形成前——彈性蛋白(pro-elastin),這時在電鏡下可見到直徑為200nm的電子密度微纖維,在成熟的彈性纖維蛋白,電密度減少或喪失,較為均勻一致。 彈性纖維與膠原纖維,網狀纖維不同,它極難容于有機或無機的溶液里。 (一)彈性纖維的變形和病理變化 隨著年齡的增長,特別是到了老年的時候,彈性纖維可發生生理性的變化,這時可觀察到彈性纖維的縱行分裂,斷成碎片,最后成為顆粒,這些變化同時也伴有化學變化,氨基酸 和鈣的含量有所增加,這些變化在皮膚是最明顯的。當有病變的時候,我們便可在切片觀察到有的彈性纖維增生,有的被破壞,斷裂、崩解,失去彈性。如主動脈瘤,就可見到瘤壁上的彈性纖維已經失去了彈性。這是由于主動脈壁的彈性纖維受到內壓的不斷沖擊,彈性纖維過度牽拉,超過它的極期,再也恢復不了原狀,因此在切片標本上(特殊染色)只能見到其痕跡或反應物。 (二)彈性纖維的染色方法 1.Weigert氏雷鎖辛品紅法(1898)(Weigerts resorcin-fuchsin method)試劑的配制: Wergert氏雷鎖辛品紅液: 堿性品紅 2g 雷鎖辛 4g 蒸餾水 200ml 30%三氯化鐵 25ml 取500ml的燒瓶加入蒸餾水和雷鎖辛,用玻棒攪拌均勻,加熱直至沸騰,持續1-2min,再加入30%的三氯化鐵水溶液繼續攪拌直至煮沸2-3min后,此時溶液的顏色變為紫羅藍色,冷卻后過濾。倒去濾液,將濾紙和沉淀物一起放入烤箱中一起烤干。取200ml95%酒精,將濾紙與沉淀物一起放入加熱溶解,除去濾紙,冷卻后過濾,用95%酒精湊足200ml,再加入4mlHCL。即可使用,保存于4℃冰箱,可長期使用。 操作方法: ⑴切片脫蠟至水, ⑵0.5%高錳酸鉀水溶液氧化5min, ⑶水洗, ⑷2%草酸漂白1-2min, ⑸水洗, ⑹入95%酒精, ⑺入Weigert氏雷鎖辛液,室溫染1-2h, ⑻95%酒精分化至背景清晰為止, ⑼Van Giesson氏液或核固紅作對比染色, ⑽脫水透明,封固。 結果:彈性纖維:深藍或深黑色,其余成分視用何種對比染色而定。 該法特點: ①可將微細彈性纖維顯示出來。 ②方法可靠,顏色鮮紅色,切片可保存。 ③配制好的染液可使用較長時間。 注意事項: ①1908年H art應用該法,將1%HCl酒精稀釋了Weigert氏原液。即原液5-20ml。酸酒精30-40ml。結果彈性纖維顯示藍色——黑色。 ②1929年French改良了這種方法,用Weigert氏原液中的2g品紅,改為1g結晶紫。結果彈性纖維顯示深藍——綠色。 ③1929年Sheridan改良了該法,Weigert氏原液中的2g品紅改用為2g結晶紫。結果彈性纖維顯示為綠色。 ④在溶化沉淀物時,應隔水溶化,不要直接于明火上加熱熔解。 ⑤配制后的染液用小磨口瓶裝,以防溶液揮發,影響染色效果。 ⑥該溶液雖可保存較長時間,但仍以新鮮配制為好。 ⑦切片在透明時,有人提出切片不要經過苯酚二甲苯。其原因之一是對已染色的切片有影響。

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