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應用激酶交換反應的末端標記
關鍵詞： 激酶 交換反應 末端標記來源： 互聯網
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應用激酶交換反應的末端標記
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1． 在置冰浴中的 1.5ml 微量離心管內依次加入：
50 pmol 合成寡核苷酸
2.5 μ l 10 ×反應緩沖液
1.5 μ l ADP （ 300 μ mol/L 終濃度）
10 μ l γ－ [32 P]ATP （ 33pmol ）
1.5 μ l T4 多核苷酸激酶（ 15U ）
蒸餾水加至 25 μ l
2． 37 ℃水浴溫育 30 分鐘。
3． 加入 2 μ l 0.5mol/L EDTA 或加熱至 68 ℃ 10min 終止反應。混合液經 Sephadex G-25 自旋轉，離心（ 2000 × g ， 4min ），去除未摻入的核苷酸。用液閃計數計數 1 μ l 柱洗脫液。
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