DNA實驗技術-實驗方法列表 - 分析測試百科網

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實驗方法>DNA實驗技術

DNA實驗技術

實驗方法

做好 ChIP 的四個注意事項

染色質免疫沉淀 (ChIP) 用于檢測細胞核中天然染色質內的蛋白質與 DNA 之間的相互作用。ChIP 實驗首先需要將細胞固定，即將蛋白質與 DNA 相互作用交聯固定到位。然后將染色質打斷為片段，使用抗體對目的蛋白質以及與其結合的所有 DNA 進行免疫沉淀。最后，解交聯，對沉淀 DNA 進行純化。純化的 DNA 可進行進一步的分析，如標準或實時 PCR、芯片或測序分析。

來源：CST 關鍵詞：ChIP; 免疫共沉淀; west-blot

原位雜交實驗要求及步驟

　　原位雜交組織（或細胞）化學（In situ Hybridization Histochemistry，ISHH）簡稱原位雜交（In Situ Hybridization），屬于固相分子雜交的范疇，它是用標記的DNA或RNA為探針，在原位檢測組織細胞內特定核酸序列的方法。根據所用探針和靶核酸的不同，原位雜交可分為DNA-DNA雜交，DNA-RNA雜交和RNA-RNA雜交三類。

來源：互聯網關鍵詞：原位,雜交

什么是上下游引物

　引物（Primer）在聚合作用的起始時，可以刺激合成另一種大分子，并與反應物以共價鍵形式連接的序列。在核酸化學中，引物是一段短的單鏈RNA或DNA片段，可結合在核酸鏈上與之互補的區域，其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點，核酸聚合酶可由其3′端開始合成新的核酸鏈。體外人工設計的引物被廣泛用于聚合酶鏈反應、測序和探針合成等。

來源：互聯網關鍵詞：上游引物下游引物

生物素標記蛋白操作方法

下面的操作方法可以使約3~5分子的生物素與1分子的蛋白結合，對某些蛋白來說，生物素與蛋白的分子比可根據不同的生物素化要求進行調整。

來源：互聯網關鍵詞：生物素蛋白

Southern 雜交操作步驟及注意事項

　　Southern 雜交是分子生物學的經典實驗方法。其基本原理是將待檢測的DNA樣品固定在固相載體上，與標記的核酸探針進行雜交，在與探針有同源序列的固相DNA的位置上顯示出雜交信號。通過Southern雜交可以判斷被檢測的DNA樣品中是否有與探針同源的片段以及該片段的長度。該項技術廣泛被應用在遺傳病檢測、DNA指紋分析和PCR產物判斷等研究中。但由于該技術的操作比較煩瑣、費時，所以現在有一些其他的方法可以代替Southern 雜交。但該技術也有它的獨特之處，是目前其他方法所不能替代的，如限制性酶切片段的多態性(RFLP)的檢測等。

來源：互聯網關鍵詞：Southern 雜交操作步驟注意事項

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