【摘　要】　【目的】探討免疫比濁法檢測糖化血紅蛋白 (HbAlc) 的應用價值。 【方法】應用免疫透射比濁法和高效液相色譜法分別測定糖尿病者 (20 名) 及健康人 (20 名) 的 HbAlc水平，比較兩種方法的相關性并進行不精密度分析。 【結果】兩種檢測方法的結果呈顯著相關性 ( r = 0198，P < 0105)，不精密度分析顯示免疫比濁法的CV < 5 %。 【結論】運用免疫比濁法檢測 HbAlc完全能夠滿足臨床需求，且標本處理簡便，不需額外的儀器，體現了良好的應用前景。

【關鍵詞】 免疫透射比濁; 糖化血紅蛋白; 高效液相色譜

一、材料和方法

1、標 　本

來自隨機抽取的我院門診病人，其中 20 位糖尿病患者，20 位非糖尿病者，標本用 EDTA2K3 抗凝并在采集后的 24 h內進行檢測。

2、儀 　器

高效液相色譜儀 (美國 BIO2RAD 公 司，VARIANT Ⅱ型)，全自動生化分析儀(瑞士Roche公司， Modular P型) 。

3、試 　劑

均為配套試劑, 其中病理質控 ( Precipath) 和正常質控 (Precinorm) 來自瑞士 Roche公司。

4、方 　法

應用免疫透射比濁法和高效液相色譜法分別測定糖尿病者 (20 名) 及健康人 (20 名) 的 HbAlc水平。其中色譜分析采用的是陽離子高效液相色譜法, 免疫比濁分析采用的是基于抗 HbAlc (肽鏈 N端的單克隆抗體) 的免疫競爭抑制比濁法。

5、數據分析

兩種方法相關性采用線性回歸分析，免疫抑制比濁法的結果按照 Roche公司提供的公式進行處理如下:

HbAlc % =〔HbAlc (g/dl) / Hb (g/dl)〕× 87.6 + 2.27

免疫比濁法不精密度分析, 分別對 Precipath 和Precinorm進行批內和日間重復性試驗(n= 20) 。

二、結 　果

1、兩種方法相關性分析

運用兩種方法分別檢測 40 份標本 HbAlc 水平(范圍: 412 %～1412 %) 。以高效液相色譜法結果為 x，以免疫比濁法結果為 y 進行線性回歸分析顯示: y = 0.9827x - 0.1955 ( r = 0.98，P < 0.05) 。

2、免疫比濁法的不精密度試驗

批內不精密度: 在同一天內，對正常質控和病理質控樣本連續測定 20 次; 日間不精密度; 每天測定一次上述樣本連續 20 d。分別計算均數 ()和變異系數 ( CV )，結果見表 1。

3 　討 　論

據世界衛生組織 (WHO) 報道, 1995 年全球已確診的糖尿病患者約 1135 億，2000 年約115億，預計 2010 年世界糖尿病患者將達到 2139 億。

近年來，隨著我國人民生活水平的提高以及人口老齡化的進程，我國每年約增加 100 萬新的糖尿病患者，可以說糖尿病已嚴重地威脅著人類的健康和生活質量。在糖尿病治療中，糖化血紅蛋白水平對評價血糖總體控制、發現治療中存在的問題以及指導治療方案的調整均有重要的臨床意義。

糖化血紅蛋白 (HbAlc) 是糖基化血紅蛋白中的一部分, 檢測穩定的糖化血紅蛋白的水平有助于評估采樣前6～8 w 的血糖水平, 對于糖尿病患者 ,不能控制好血糖的水平，將大大增加病死率以及并發癥的出現幾率。

有關糖尿病的控制和并發癥的研究表明糖化血紅蛋白水平增高會加大并發癥的發病風險 (視網膜病變、腎病、神經系統疾病等) ;反之，如果糖化血紅蛋白水平降低將預示發生并發癥的風險程度大大降低。在歐美等國家，認為對于糖尿病患者，糖化血紅蛋白的水平最好控制在7.5 %以下。

由于 HbAlc 的監測對于糖尿病的管理如此重要 (有的國家的疾病管理建議對于Ⅰ型糖尿病，要每 3 m檢測一次糖化血紅蛋白，對于 Ⅱ型糖尿病，應該每 6 m檢測一次糖化血紅蛋白)，而且檢測的患者平均以 15 %～20 %的比例在增長。所以選擇一種可以廣泛使用的，準確穩定的檢測方法變得非常重要。

一直以來，應用高效液相法 ( HPLC) 檢測HbAlc被認為是最穩定和準確的方法，但是由于需要額外地購置儀器，而且標本處理以及檢測過程比較繁瑣，不能夠被廣大的醫院采用。同時隨著糖尿病患者的越來越多，臨床需要更加方便、快速的檢測方法。

從以上的結果分析可以看出，Roche 免疫比濁檢測 HbAlc有較好的檢驗重復性 ( CV < 5 %)，完全可以滿足臨床的需要，而且與經典的 HPLC 法的相關良好。

另外，相對于 HPLC 的需要特定的儀器，操作比較麻煩等問題，免疫比濁的應用更為簡單，不需要額外添加儀器，而且結果的精密度十分良好，為醫生調整糖尿病治療方案提供確實可靠的依據。這樣的優勢應該會使其在未來的 HbAlc檢測中發揮更大的作用。

【參考文獻】

1 葉應嫵. 全國臨床檢驗操作規程 M . 第 2 版. 南京: 東南大學出版社, 1997. 166.

2 Moridani MY, Ver jee Z，Allen LC. Analytical evaluation of hemoglobin Alc dual kit assay on Bio2Rad Variant Ⅱ: an automated HPLC hemoglobin analyzer for the management of diabetic patients J . Clin Biochem，2003，36 : 317.

3 Gremmels HD，Richter A，Watzke I. Evaluation of thehemoglobin Alc2analyzer TOSOH HLC2723G7 J . Clin Lab ,2003，49 : 243.

4 John WG. Haemo globin Alc : analysis and standardization J .Clin Chem Lab Med，2003，41 : 1199.

5 郭健, 陸紅, 劉宏, 等. 免疫比濁法測定血清糖化血紅蛋白J . 臨床檢驗雜志, 1997，15 : 10