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  • 實驗方法> DNA實驗技術> DNA原位雜交技術>核糖核酸酶保護測定

    核糖核酸酶保護測定

    關鍵詞: 核糖核酸酶 保護來源: 互聯網

    1. 加入適當體積的RNA(<12 μl)+探頭(<3 μl)。

    嘗試5和10μg 的RNA加600或800頁高辛標記的探針。

    2. 包括2-3的酵母RNA樣品/探針使用。

    3. 加入20 μl SOLN。 A到所有渦管(FV =30 μl)和自旋向下。

    4. 孵育90-95℃,5分鐘使之變性。冰降速。

    5. 在42-45'C在干燥的孵化器或水浴孵育O / N。

    6. 核糖核酸酶消化:稀SOLN。 R在SOLN。 Bx的1:100。每個樣品中添加200 μl 。1:300稀釋增加66.7 μl 以上的SOLN133.4 μl。 BX。Bx的單獨以酵母RNA樣品。

    7. 渦的所有樣本,然后降速。

    8. 孵育在37℃長達30分鐘。渦然后停止運轉。

    9. 添加300 μlSOLN。 DX。渦然后停止運轉。

    10. 儲存于-20'C15分鐘。

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