一、材料

1. Resazurin細胞活力檢測試劑盒（Biotium，Inc.30025）

2. 細胞：在本試驗中，使用了三種人類前列腺癌細胞系進行檢測。

（1）DU145（ATCC，HTB-81）

（2）PC3（ATCC，CRL-1435）

（3）LNCap（ATCC，CRL-1740）

二、儀器

1. SpectraPLUS酶標儀

三、步驟

1. 標準曲線制備：

（1）在96孔板中加入100 μL 培養基，然后接種適量細胞，貼壁細胞控制在40~10 000/孔，懸浮細胞控制在2 000~500 000/孔。用100 μL 不加入細胞的培養基作為空白對照。

（2）在培養基中加入10 μL resazurin溶液，37℃過夜培養細胞（1~24小時）。

（3）使用微量酶標儀分別檢測570 nm 和600 nm 下的吸光值。

（4）獲得每一個樣品的在OD570和OD600下的吸光值，制作標準曲線來確定試驗中的最適細胞濃度。

2. 細胞活力分析：

（1）選擇最適的細胞濃度，使用96孔板進行細胞培養。對于人類前列腺癌細胞DU145，PC3andLNcap，經常使用的濃度是2 000-5 000/孔。

（2）根據你設計的試驗，在對應的孔中加入相應試劑對細胞進行處理一段時間。

（3）在培養基中加入10 μL resazurin溶液，37℃過夜培養細胞（1-24小時）。

（4）使用微量酶標儀分別檢測570 nm 和600 nm 下的吸光值。

（5）獲得每一個樣品的在OD570和OD600下的吸光值，區分處理的樣品和對照樣品的吸光值，將對照樣品的吸光值設置為100%來計算處理后細胞的活力。

（6）細胞活力=（檢測樣品的OD值）/（對照樣品的OD值）x100%