用T4連接酶實現10分鐘快速TA克隆的新方法

目前市場上常見的TA克隆試劑盒，根據連接方法可以分成兩種：

方法1：

以T4連接酶進行連接的方法，這兩種方法轉化子比較多，陽性率也不錯，唯一的不足就是連接的時間長。因為連接時間越長效率越高，一般快速連接方法需要半個小時到一個小時；達到最佳的效果，要過夜連接。

方法2：

以拓撲異構酶（TOPO）進行連接的方法，這種方法的優勢是快速連接，在5-15分鐘就可以將目的基因克隆到載體中，陽性率比較高，這種方法國內也有人模仿。這種方法雖然速度快，但是也有一些缺陷，比如長片段連接效率不如T4連接酶，轉化子少，TOPO酶對溫度很敏感，穩定性較差。

百泰克公司新近又推出了一款用T4連接酶進行10-15分鐘快速TA克隆的試劑盒，不僅能夠繼承T4連接酶連接的優點，而且能夠達到10分鐘快速克隆的要求，大大的節省了實驗的時間，提升了效率。

該試劑盒的連接酶仍然是T4連接酶，但是連接的體系為百泰克自主開發的新技術，能促進片段快速連接，該體系也可以用在其他TA克隆載體的快速連接。