EDTA和Tris的混合液,配方：Tris-Cl (pH7.4) 20mM，EDTA 1mM.可加入蛋白酶抑制劑,提取磷酸化的蛋白還需加Na3VO4 0.1mM及NaF 25mM）。 ⑴ 勻漿 對于組織,可每50~100mg加1ml裂解液，肺100~200mg加1ml裂解液。可手動或電動勻漿。注意盡量保持低溫，快速勻漿。 ⑵ 12000g離心，4℃，2min。 ⑶ 取少量上清進行定量。 ⑷ 將所有蛋白樣品調至等濃度，充分混合沉淀加loading buffer后直接上樣最好，剩余溶液（溶于1×loading buffer）可以低溫儲存，-70℃一個月，-20℃一周，4℃ 1~2天，每次上樣前98℃，3min。