印跡技術

1975，Edwen Southern提出分子印跡概念。

概念：將存在于凝膠中的生物大分子轉移（印跡）于固定化介質上并加以檢測分析的技術。目前主要應用于DNA,RNA，蛋白質的檢測。

蛋白質免疫印跡法

Western blotting: 免疫印跡法是檢測蛋白質混合溶液中某種特定目的蛋白質的定性方法，也可以作為確定同一蛋白質在不同細胞或者同一種細胞不同條件下的相對含量的半定量方法。由于其檢測往往需要抗體，所以也被稱為免疫印跡技術。

應用

1 檢測樣品中特異蛋白存在與否

2 細胞中特異蛋白的半定量分析

3 蛋白質分子相互作用的研究

實驗操作

1 細胞裂解物的準備；

2 細胞裂解物的蛋白定量；

3 細胞裂解物的SDS-PAGE；

4 蛋白質的轉移；

6 目的蛋白質的檢測。

免疫印跡只能檢測目的蛋白的相對含量

測定相對含量時，需要內參照

選擇合適的反應條件：SDS-PAGE膠濃度；轉移膜的選擇；轉移時間的選擇

注意電極的正負極

抗體反應時，注意驅除反應袋內氣泡

操作要輕柔。