用精確質量測定及其輪廓離子提取高通量識別體外代謝物

       代謝物的早期識別，對于合成代謝穩定化合物、識別藥理活性或有毒代謝物，為化學家提供了重要信息。串聯四極桿LC-MS/MS 系統是代謝物篩查廣泛使用的儀器，但它只能提供名義質量數據。最新發展的MassWork質譜技術能夠將名義質量數據轉變為精確質量數據，用于代謝物的精確分子式測定。另外，這個技術也能在單位質量分辨質譜上進行精確質量輪廓離子提取或質量虧損過濾，以消除假陽性色譜峰，這種方式大大提高了代謝物篩查的數據處理通量。這里描述了一種利用串聯四極桿LC-MS 和采集后處理程序，進行體外代謝物識別的方式。


目的：

      利用單位質量分辨LC-MS的精確分子式識別、精確質量輪廓提取離子圖（AMPXIC）和質量虧損過濾進行體外代謝物識別。

方法：

1、老鼠肝微粒體培養：異博定、洛哌胺、丁螺環酮
2、液相色譜/串聯質譜Waters Quattro Micro，Agilent 1100 HPLC
3、利用采集后處理程序將名義質量數據轉變為精確質量數據：
      采集后數據處理程序MassWorks在一次LC-MS運行，利用單一離子校正，將名義質量數據轉變為精確質量數據。精確質量輪廓提取離子圖（AMPXIC）或質量虧損過濾（MDF）程序，用于消除樣品中的假陽性色譜峰或內源性干擾。

結果：

• 利用單一校正離子，第一階段代謝物數據采集后處理，得到的質量精度在3~10 ppm，譜圖準確度大于99.0%
• 通過精確質量測定和同位素輪廓方法過濾得到的精確質量輪廓提取里子圖（AMPXIC），可以消除傳統XIC圖中假陽性色譜峰。
• 質量虧損過濾（MDF）技術的應用，需要對整個質量范圍的全部離子，包括母藥、代謝物和內源干擾物，進行精確質量測定，而這些不能通過單一校正離子得到。