蛋白質分離純化一條街：凝膠過濾層析用于樣品前處理

凝膠過濾層析用于樣品前處理過程包括以下幾種情況：歡迎補充

1  蛋白質溶液脫鹽處理：

①如蛋白質樣品進行MALDI TOF MS分析前需要的脫鹽處理，以降低鹽分對目標蛋白離子化效率的影響；②蛋白質溶液鹽析處理獲得的目標蛋白需要脫鹽處理；③離子交換或疏水層析得到的目標蛋白溶液也需要脫鹽處理；

2  去除小分子標記物

在進行特殊基團衍生或處理后導致的溶液中殘余的小分子，如自由巰基衍生后的剩余的衍生劑的去除等；

3  去除添加物或酶的保護劑

許多蛋白質尤其是酶制劑在冷凍保存時需要添加保護劑，在使用前需要將小分析添加物去除，大家從Sigma公司購買的酶制劑在使用前一定要注意有沒有小分子保護劑，某些情況下（不是全部）添加物會影響我們的試驗結果；

4  去除小分子抑制劑（歡迎補充）

5  緩沖液體置換

如目標蛋白進行酶解處理前的溶液需要更換為適合酶催化翻譯的離子種類、離子強度和pH條件。

常用脫鹽介質：

     Sephadex G25

粒徑：90-260微米

排阻極限：~5000Da

pH穩定范圍：2-13

特點：容量高，處理快速，高效

     Sephadex G10

粒徑：60-160微米

排阻極限：~700Da

pH穩定范圍：2-13

特點：適合多肽、寡糖類以及親水性較強的蛋白溶液中脫除鹽類、染料、同位素標記物，以及分子量范圍較高的多肽質譜分析前脫鹽等。