LDN-IL-1βELISA（RUO）試劑盒：優化的實驗設計用于精確測量

人類白細胞介素-1（IL-1）是宿主對各種感染性、炎癥性和免疫學挑戰反應的關鍵介導因子。兩種不同的多肽，即IL-1α和IL-1β，介導IL-1的生物活性，并且都與相同的細胞表面受體結合。它們最初被合成為31-kDa的細胞內前體，隨后在單核細胞上清液中作為17-kDa的成熟蛋白被發現。也已經描述了膜結合的IL-1，這可能是IL-1介導的局部效應的一部分。IL-1的主要來源是血液單核細胞和組織巨噬細胞。其他特殊細胞，如T細胞和B細胞、各種上皮細胞、內皮細胞以及一些間充質細胞，也能產生IL-1。IL-1β是由單核細胞和巨噬細胞分泌的主要形式，人們認為它們是循環（血漿）IL-1的主要來源。在血漿和其他生物液體中已經描述了對IL-1活性的抑制。IL-1影響幾個無關的組織，并且是“急性期”炎癥反應的主要介導因子，這些反應以代謝、內分泌和免疫功能的改變為特征。這種細胞因子在T細胞激活中具有重要作用，提供了IL-2（T細胞生長因子）產生的必需信號之一。它是通過作用于神經系統（發熱、睡眠、厭食）、骨髓來源的細胞（中性粒細胞、單核細胞和淋巴細胞的趨化和/或激活）以及各種組織（成纖維細胞增殖、軟骨和骨基質的吸收、膠質細胞增殖、刺激內皮細胞的促凝血活性等）來介導炎癥過程的主要因子。

艾美捷LDN-IL-1βELISA（RUO）試劑盒（ILE-3000R）：

名稱：IL-1β酶聯免疫分析法（ELISA）

描述：

用于人血清和血漿中白介素1β（IL-1β）的定量測量的酶免疫分析法。

設計：ELISA

樣本體積：

200微升血清或血漿

總測定時間：2小時15分鐘

標準范圍：0/24 – 1,166皮克/毫升

靈敏度：0.35皮克/毫升

儲存條件：2 – 8攝氏度

試劑盒：96次測定

CE認證：是

LDN-IL-1βELISA（RUO）試劑盒檢測原理：

IL-1β酶聯免疫分析法（ELISA）是一種在微孔板（microtiterplate）上進行的固相酶放大靈敏度免疫分析法。該分析法使用針對IL-1β不同表位的單克隆抗體（MAbs）。校準品和樣本與涂覆在微孔板孔上的捕獲單克隆抗體（MAb 1）反應，并與標記有辣根過氧化物酶（HRP）的單克隆抗體（MAb 2）反應。在孵育一段時間后，形成三明治結構：包被的MAb 1 – 人IL-1β – MAb 2 – HRP，隨后洗滌微孔板以去除未結合的酶標記抗體。通過顯色反應測量結合的酶標記抗體。加入顯色溶液（TMB）并孵育。通過添加停止液來停止反應，然后在適當的波長下讀取微孔板。通過比色法測量吸光度來確定底物轉化量，該吸光度與IL-1β濃度成正比。繪制校準曲線，并通過校準曲線插值確定樣本中的IL-1β濃度。使用ELISA讀取器（線性范圍高達3個OD單位）和先進的數據簡化方法（多色數據簡化），在低范圍內實現了高靈敏度，并擴展了校準范圍。

LDN-IL-1βELISA（RUO）試劑盒結果的計算：

1 多色讀數

1. 在這種情況下，軟件將進行數據處理。

2. 首先，使用650納米（或630納米）的參考濾光片，在450納米處讀取板。

3. 然后，使用相同的參考濾光片，在490納米處進行第二次讀數。

4. 軟件將自動驅動讀取器，并將兩次讀數整合到多色模型中。該技術可以生成高達10.5的OD值。

5. 多色數據處理的原理如下：

Xi = 450納米處的OD值

Yi = 490納米處的OD值

使用標準無加權線性回歸，計算參數A和B：Y = A*X + B

如果Xi < 3個OD單位，則計算的X = Xi

如果Xi > 3個OD單位，則計算的X = (Yi-B)/A

使用4參數邏輯曲線擬合來構建校準曲線。

通過在校準曲線上插值，確定樣本中IL-1β的濃度。

2 雙色讀數

1. 使用設置在650納米（或630納米）的參考濾光片，在450納米處讀取板。

2. 計算重復測定的兩次讀數的平均值。

3. 在半對數或線性坐標紙上，將每個校準品的OD值（縱坐標）與其相應的IL-1β濃度（橫坐標）繪制出來，并用直線連接繪制的點，通過校準點繪制校準曲線。

4. 通過在校準曲線上插值，讀取每個對照品和樣本的濃度。

5. 計算機輔助數據簡化將簡化這些計算。如果使用自動結果處理，建議使用4參數邏輯函數曲線擬合。

LDN Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG（簡稱LDN）旨在開發、制造和向臨床和研究實驗室市場提供專業的體外診斷測試系統和創新技術。艾美捷科技是LDN Labor Diagnostika Nord的中國代理商，為科研工作者提供優質的產品與服務。

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