高效液相色譜- 熒光衍生法在體內藥物分析中的應用

摘要：體內藥物分析是在大量復雜組分中進行微量或超微量藥物及代謝產物的測定。體內藥物分析最常用的檢品是血樣(血漿、血清、全血)、尿樣、唾液及組織液, 特殊情況下也采用乳汁、淚液、膽汁、羊水、糞便等[1]。隨著藥物的開發研究, 藥物
的服用劑量越來越小, 體內藥物的濃度越來越低, 這對分析方法靈敏度和選擇性等都提出很高的要求[2]。高效液相色譜法具有準確、靈敏度、專一性強等特點, 一直是體內藥物分析的主要手段[3]。而高效液相色譜的熒光檢測器比紫外吸收檢測器靈敏度高。具有強紫外吸收的化合物檢測靈敏度可達ng水平, 而熒光衍生物一般的檢測水平為10-12～10-14m ol/L,靈敏度比紫外檢測器提高10～1000 倍[4]。故H PLC 法結合熒光檢測法所具有的較高的選擇性及靈敏度以及試樣用量少的特性, 使得對復雜生物樣品中藥物及其代謝物的測定變得更加靈敏、準確、快速。但熒光檢測器要求被檢測樣品能被激發產生熒光. 對于不產生熒光或熒光較弱的樣品靈敏度很低, 甚至不能檢測。為了擴大檢品范圍, 提高檢測靈敏度, 常采用熒光衍生法。熒光衍生法是指在一定條件下利用某種試劑與樣品中待測組分相作用, 使其產物具有熒光或熒光增強。另外,熒光檢測器選擇性好, 過量的試劑和副產物往往不產生干擾, 衍生物亦不必純化, 因此熒光衍生技術的采用, 擴大了高效液相色譜- 熒光測定法在體內藥物分析中的應用范圍, 為藥物代謝動力學, 臨床藥理學和毒理學等研究提供科學依據。