腸道病毒71 型感染前后宿主細胞蛋白質組的二維液相色譜分離和比較

摘要:以腸道病毒71 型及其宿主細胞為研究主體,建立了一種二維液相色譜分離和分析比較病毒感染前后細胞蛋白表達譜的方法。該方法以高效液相色譜(HPLC) 為技術平臺,對細胞裂解物先后進行一維色譜聚焦分離和二維反相色譜分離。利用ProteoVue 軟件將二維色譜數據轉換成模擬膠圖,再利用DeltaVue 軟件對感染前后的宿主蛋白表達譜進行比較和分析,找出差異蛋白。二維液相色譜分離法能夠根據蛋白的等電點和疏水性建立精確的細胞蛋白表達圖譜,每012 個pH 為一個收集區段,在pH815～319 的范圍內可見蛋白條帶約1 200 條。該方法良好的重現性、自動化以及結果分析的簡易化,使之在細胞表達譜差異顯示中的應用潛力巨大,并且為研究病毒與宿主相互作用提供了新的方法和思路。