ONO- AE- 248 誘發中性粒細胞非凋亡性程序化死亡的蛋白質組學分析方法的建立

【摘要】目的：建立雙向電泳技術和質譜技術在探索ONO- AE- 248誘發的中性粒細胞(neutrophil，PMN)非凋亡性程序化死亡的分子機理研究中的應用，為深入認識“非凋亡性程序化死亡”這種新的死亡方式提供新的有效的研究途徑。方法：將采用梯度離心法分離的，人正常PMN，分為正常對照組和實驗組，實驗組用ONO- AE- 248刺激12小時建立非凋亡性壞死模型，提取對照組和實驗組全蛋白，雙向電泳分離蛋白質，采用PDQuest 2- DE軟件分析找出兩組間差異表達的蛋白質斑點，用基質輔助激光解吸電離飛行時間串聯質譜(MALDI- TOF-MS)進行鑒定。結果：雙向電泳圖譜顯示：ONO- AE- 248誘導的人PMN非凋亡性程序化細胞死亡與PMN的自發性凋亡的蛋白質組存在差異顯著，質譜鑒定初步得到其中12種差異表達的蛋白質。結論：雙向電泳和質譜鑒定技術可以有效的分離和分析ONO- AE- 248誘發的PMN非凋亡性壞死的蛋白質組，為進一步探索“非凋亡性程序化死亡”方式提供了新的方法和途徑，為豐富細胞死亡方式帶來了新的前景。