DMSO 處理后中國倉鼠卵巢細胞的蛋白質組變化分析

上一篇 / 下一篇 2009-01-11 19:41:40/ 個人分類：蛋白質

文件版本: V1.0
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摘　要: 在培養基中添加二甲基亞砜(DMSO) 可使基因工程中國倉鼠卵巢細胞(CHO) 外源蛋白乙肝表面抗原(HBsAg) 的比生產速率提高4 倍以上. 為了進一步研究DMSO 的作用機理,采用雙相凝膠電泳技術分離在培養基中添加1. 5 %的DMSO 后CHO 細胞的總蛋白,膠態考馬斯亮藍G- 250 染色,GS - 800 凝膠掃描儀獲取凝膠圖像,并用PDQUEST 軟件分析,測得每張圖譜平均斑點數量為1 852 ±123 ,以其中一塊膠為參考膠進行4 塊膠間的斑點匹配,其平均匹配的點數達1 326 ±100 ,平均匹配率為71. 6 %以上. 通過分析得到18 個蛋白質點在添加了DMSO 后表達量有明顯變化(其中12 個蛋白表達量明顯降低,6 個蛋白表達量明顯增加. 用基質輔助激光解析電離飛行時間質譜測定其膠內酶解后的肽質指紋譜圖和串級質譜圖,用GPS 軟件查詢NCBI 數據庫進行了鑒定. 鑒定結果表明,這些差異蛋白中一些是與細胞周期有關的蛋白,一些是與細胞能量代謝相關的蛋白,還有一些是與蛋白翻譯后修飾有關的酶,這些結果進一步深化了對DMSO 提高CHO 細胞表達HBsAg 的機理的理解.

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