血液蛋白質組與質譜儀檢測流程標準化初探

摘要:目的 探討不同的標本處理和儲存條件對蛋白指紋圖譜技術檢測血清多肽及低分子量蛋白質(1～30 ku)的影響。方法 將血液凝固后馬上分離得到的血清分裝后分別置于- 80 ℃ 6個月以上以及室溫、4 ℃條件下2～72 h進行蛋白質質譜分析。結果 血清樣本在- 80 ℃ 6個月以上以及4 ℃或者25 ℃保存2 h或者反復凍溶1次,對多肽及低分子量蛋白質的影響相對較小。將血清用U9緩沖液稀釋后放置于室溫,在24 h內結果穩定。溶血會對蛋白質組的結果造成很大影響。結論 建議血液標本的處理、運送、操作及儲存的蛋白質質譜分析的標準條件是: 4 ℃下處理血液標本, 2 h內盡快分離血清及細胞。用U9緩沖液稀釋血清后,可以24 h內在室溫下運送或對血清及WCX磁珠結合過程進行操作。血清應分裝并長期儲存在- 80 ℃,但限凍溶1次。溶血標本應棄用,建議重新取血。